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人β2NGF基因在CHO细胞中表达的生物学活性及分离纯化.pdf
β
白艳艳等 人 NGF 基因在 CHO 细胞中表达的生物学活性及分离纯化 第 5 期 3·43 ·
β
人 NGF 基因在 CHO 细胞中表达的生物学活性及分离纯化
②
白艳艳 杨吉成 缪竞诚 盛伟华 韩晓枫 李丽娥 谢宇锋 周忆新
(苏州大学基础医学系细胞免疫中心 ,苏州 215007)
中国图书分类号 R39233 文献标识码 A 文章编号 1000484X( 2003)
β β
[摘 要] 目的 :检测人 NGF 基因转染 CHO 细胞后培养上清中所表达的 NGF 的生物学活性及分离纯化。方法 :采用
脂质体介导的真核细胞转染 ,运用形态学观察和 MTT 法进行检测做定性定量分析 ,蛋白观察用 SDSPAGE 电泳。结果 :转染 β
β β
NGF 基因的 CHO 细胞可分泌能促进 PC12 细胞生长的活性 NGF ,且可透过血脑屏障。结论 :转染 NGF 基因的 CHO 细胞所
β
分泌的 NGF ,接近自然合成的蛋白 ,具有较高生物学活性 ,为 NGF 的生物制药奠定了实验基础。
[ 关键词] 人β
NGF ; 真核转染 ;表达
The study of biological activity of the expression products of the human β
NGF cD
NA in CHO cell line and purified the seperated protein
BAI YanYan , YANG JiCheng ,MIAO JingCheng et al . The Center of Cellular Immunology , Department of Biotechnolo
gy , Suzhou University , Suzhou 215007 , China
β
[ Abstract ] Objective :To detect the biological activity of the expression products of the human NGF cDNA in CHO cell line and pu
β
rified the seperated protein. Methods :Human NGF was transfected with lipofectamine reagent into CHO cell line. The biological activity was
analyzed by objection with microscope and the method of MTT. The pure protein was proved by SDSPAGE analysis. Results :The protein in the
β
culture supernatant of the positive CHO cells transfected with NGF gene could stimulate the growth of PC12 cell line and go into BBB. Con
clusion :The target gene
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