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卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’()!*’)# 年 月 #$$! % !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( +,-./ #$$! - 12 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人 基因在大肠杆菌中的高效表达、纯化及其生物学活性研究 !$% # 赵跃然 王郡甫 游力 高春义 田志刚 张捷 韩娜 尹进 孙 (山东省肿瘤生物治疗研究中心,山东省医学科学院基础医学研究所 济南 ) #2$$6# 摘 要 将人 表达质粒 转化 ,经热诱导获得了目的蛋白的表达。经 鉴 F4GC H##$0IH 340(,#J+!$1 KLK0MNO: ? ? 定分析,表达产物以包涵体形式存在,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 以上。通过包涵体分离, 7$P K4/,.-( ? = K#$$QR凝胶和 离子交换层析及 柱反相色谱纯化,获得纯度在 以上,内毒素含量小于 L:N:2# Q 4-D(S!5 12P =? / 的高纯度的重组人 。 鉴定表明,纯化表达产物能和抗 抗体特异性结合;蛋白质 !$:T ; F4GC V4DG4-C0A(’G F4GC U ? ? 端 个氨基酸序列分析结果和预期的序列一致。纯化产物经复性处理,其分子中 和 形成二硫键。 * !2 S D16 S D!76 = = 体内活性检测显示,纯化和复性的 明显抑制 /小鼠的进食和体重增长,提示其具有明显的生物学 -/0F4GC HNFH . ? 活性。 关键词 ,基因表达,大肠杆菌, ,蛋白纯化 F4GC J+!$1 ? 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) R%!5 N !$$$0%$6!#$$!$#0$!20$7 是近年来发现的由肥胖基因( ;其它为进口或国产分析纯试剂。 F4GC IA4D4 WC.) ?

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