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维普资讯 威宁压学皖学报(JXNMC) 1997；11(2) 几种细胞增殖活性研究方法的评估 剜复兴黄孝立 病理学教研室 摘 妻 为确立一种更能准确反姨细胞增殖活性的方法．分暑I用免疫组化LSAB法和肢银染 色法，对50例食管癌进行了PCNA和G-myc表达的半定量舟析和AgNORs计披。结果PCNA标 记百分宰在不同程度分化的食蕾癌中差异星著(P0．05)，而C-myc和AgNORs计教在吝教之闻 结果重量 PCNA标记百分事是一个更哉堆确反映细胞增殖活性的良好指标。在肿擂诊断中具有 较高实用价值。 关键词 增殖活性；免疫蛆织化学；棱仁组成区；食管鳞癌 细胞增殖活性的检测在肿瘤鉴别诊断中的 LSA／3“￡剂盒 系美蹦zymecl公司产品，硝酸铱 应用越来越广泛。目前研究细胞增殖活性的方 为上湃试剂一厂产品 法很多 “0J。其中与肿瘤生长有关的核仁蛋 方法：免疫组化用LS．Ij方法，一抗PC1J 白如增殖细胞核抗原(Proliferatingcellnuclear 按1：800稀释，SC一42按 1200稀释，DAB 色 antigen，PCNA)L4}，核仁组成区相关嗜银蛋白 加苏术素复染。用正常血清代替一抗作阴性对 (Sliver-stainingnuclearorganizerregionas~oci— 照；刚 时照：PCNA用淋岂fl织阳染标 ，c— atedprotein，AgNORs)t5)的研究是近年开拓出 myc用结肠癌C-mye阳染标本。胶银染色用 的一个新的领域。一些增殖相关基因(如C Ploton等改良方法 。 myc fos、 等)过表达舶检测也已应用于肿 统计处理：免疫组化半定量分级，每洲切片 癌细胞增殖的评估。本实验用免疫组化方法和 连续计数l0×100个细胞中的阳性细胞数，换 胶银染色方法比较PCNA、C-myc表达和Ag— 算成百分率，以每25个百分点为一级定为+～ NORs计数在评估食管癌细胞增殖活性舶意 四级，无阳性记作(一)。AgNORs计数在油 义，以确定一种更能准确反映细胞增殖活性的 镜下计数 100个细胞中颗粒数，取其均值 用 指标。 检验和t检验进行统计分析。 l 材料和方法 2 结 果 标本：5O例食管鳞瘟(男32铡．女l8例． PCNA、C-myc阳性反应颗粒均为棕黄色， 平均年龄47岁)来源于河南医科大学第一附属 均定位于核内，PcNA清晰无扩散，而C-myc有 医院手术切除标本(术前未经任何治疗)，按组 胞浆扩散(图1．2)。AgNORs颗粒黑色．分散 织分化程度分为三组．I级2O例，Ⅱ级l8饲， 于核内(图3)。 皿级 12倒。 51I例食管鳞癌PCNA均为阳性．阳性细胞 试剂：一抗鼠抗人PCNA单抗PC10系美 百分率从23％～83％不等。且阳性反应分级 国DaKo公司产品．鼠抗人C-myc单抗 SC-42 与癌组织分化程度之间有显著性负相关(附 【IgG1】系美国SANTACRUZ公司产品， 表)。C~mye阳性反应仅见于38例，其阳性细 ① 河南医科大学病理学教研室 维普资讯 威宁医学瓮学报 (JXNMC) 1997；11(2) 胞百努辛苦遍低于PCNA，且随癌组织恶性程 3 讨 论 度的升高而有增高趋势，但无统计学意义(P 0．05) AgNORs计数在各组食管癌之问亦有 AgNORs是一种与肿瘤增殖有关的棱仁蛋 差异，印分化程度越低，AgNORs数就越多，