四甲基氯化铵在杨树RAPD扩增反应中的作用.pdfVIP

植物资源与环境学报 x【l1，1o(2)：1l一13 JournaloJPhmtResourcesandEnvirormzen： 四甲基氯化铵在杨树 RAPD扩增反应 中的作用 尹佟明，李淑 ，郑阿宝，王明嘛 f南京林 凡学．扎苏 南京 210037) 摘要 ：根据 20个不同RAPD随机引物对杨树 DNA的扩增结果，跗叫 基篱化铵 (TMaCU住杨树 RAPD扩增反应中 的作刚进行了研究，发现TMAC1 明 改善杨树的ILaJ~D扩增效果．因此 T~L4C1可作为一种有效成分加^杨树 K4PD反血体系中：同时比较了 同诳度的TMAC1对杨树 R H】扩增反应 的影响．确定最迁合杨树 RAPD扩增反应 的TMACI浓度为 10…50 mol／L 利州3个其亲缘关系的杨树家系埘含 TMACI的RAPD反应体系的实验结果进行 验征．证实恢体系获得的遗传信息是可靠的。 关键词 ：四甲基氯化铵 ；RAPD；扩增反应特异性 ；杨树 中图分类号：s79211；QOM6-33 文献标识码：A 文章编号：1004-0978(2001)02—00l1-03 effectoftelramelhvlalllnloniuTn chlorideoR RAI．D amplification in poplar Y Tong．ming．1Jl Shu-xim~．z}ⅢNGA—bao，WANG Ming—xiu (NanjingForest~,University，Nanjing2l0037，China)，J． PlantResour ＆ Environ．200】，10(2)：l1—13 Abstract：According to the amplification resultin poplarby20 lO-metarbitr~ ／prireels．the effectof tetramethylammonium c|dofide(TMACI)onRAPD all|plifieation inpoplarw∞ studied．Itrevealed山at山e effectofTMACIon}{AIDamplificationissiglfificantandMaich(舢 improve山eresultofRAPDamplification． TMACICallbeUSedasan effectivecomF,c．sition fnras,：~nnbling山eltAPD reaction．_rheeffectofdifferent concentrationof _¨吡 CIonRAPD amplificationwasalSOstudiedand 山esuitableconcentration 【l0—5O ~nol／L)ofTMAC 【tlSed intheRAPD rem-tionforpoplarwasdetermined Inordeltote~．t山enew reaction system．thleepedigreeswithclearrelationship Ⅵereadopted．andtheresultshowed 山atthenew system iS reliablernrgeneticstudy． Keywords：TMACI；RAPD；specialityofamplifiedaction；poplar 由于林木分子生物学研究起步较晚，缺乏基 园 PCR扩增过程 ．TMACI是否对 RAPD扩增 反应 的结 绀序列的相关信息 “，而 IL~PD 0技术不需要预知 果也有一定的作用 ．本文以杨树 DNA为实验材料对 DNA序列的信息，而是利用随机引物进行扩增 ，而 这一问题进行 厂探讨 且与其他的分子标记技术相 比，IL4PD实验过程更 为简单 、快速 、成本低，因此该技术是 目前林木遗传 1 材料和方法 研究中使用最为广泛 的一种标记技术’。 但 IL4PD 反应过程中，由于引物的Tm值较低，反应产物的特 1．1 实验材料 异性较差