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肝癌中高表达的新基因LAPTM4B对细胞增殖及成瘤性的影响.pdf
北 京 大 学 学 报 （ 医 学 版 ）
·348 · JOURNAL OF PEKING UNIVERSITY（HEALTH SCIENCES ） VoI. 35 No. 4 Aug. 2003
·论著 ·
肝癌中高表达的新基因LAPTM4B 对细胞增殖
及成瘤性的影响
何 静，邵根泽，周柔丽
（北京大学基础医学院细胞生物学与遗传学系，北京 100083 ）
［关键词］肝肿瘤；基因；转染；细胞增殖
［摘 要］目的：研究在肝细胞癌中高表达的新基因LAPTM4B 对小鼠NIH3T3 细胞生物学行为的影响，探讨
LAPTM4B 基因的生物学功能。方法：构建真核表达质粒pcDNA3-TM4B，利用脂质体稳定转染LAPTM4B cDNA 至
NIH3T3 细胞中，用RT - PCR 、Northern 和Western 杂交法筛选和鉴定转染后LAPTM4B 基因高表达的单克隆细胞
株，研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果：与转染空载体的对照组相比，转染了LAPTM4B cDNA 的
NIH3T3 细胞表面发生明显变化，微绒毛的数量和长度增加，多分枝且缠绕成团。转染细胞在纤黏连蛋白、人工基
膜和层黏连蛋白基质上的黏附/ 铺展能力增强。生长曲线显示转染细胞的生长速率增高。流式细胞仪检测显示转
染细胞的S 期细胞数比未转染细胞显著增多，而G0 ~ G1 期细胞数减少。Western 杂交显示CycIin E 蛋白在转染细
胞中的表达显著增加。转染细胞对血清的依赖性下降并具有成瘤性。结论：
LAPTM4B 基因能影响细胞增殖的调
节，促进NIH3T3 细胞的增殖，并使NIH3T3 细胞具有成瘤性，在肿瘤发生过程中具有重要的作用。
［中图分类号］
R735. 7 ［文献标识码］A ［文章编号］167 1-167X（2003 ）04-0348-05
Effects of the novel gene ，LAPTM4B ，highly expression in hepatocellular carcinoma
on cell proliferation and tumorigenesis of NIH3T3 cells
HE Jing ，SHAO Genze ，ZHOU RouIi
（Department of CeII BioIogy and Genetics ，Peking University SchooI of Basic MedicaI Sciences ，Beijing 100083 ，China ）
KEY WORDS Liver neopIasms ；Genes ；Transfection ；CeII proIiferation
SUMMARY Objective ：To study the bioIogicaI effects of the noveI gene LAPTM4B high expressed in
hepatoceIIuIar carcinoma on ceII proIiferation and tumorigenesis of NIH3T3 ceIIs. Methods ：Eukaryotic
expression pIasmid pcDNA3-TM4B was constructed and transfected into mouse NIH3T3 ceII Iine using Li-
pofectamin-2000 mediating gene transfer technigue. MonocIonaI transfected ceIIs with high expression of
LAPTM4B gene were identified and seIected by RT - PCR ，Northern bIot and We
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