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鸡白细胞介素18(ChIL18)重组蛋白的生物学活性检测.pdf
业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2007,15 (1): 5~ 10
·研究论文·
鸡白细胞介素-18(ChIL-18)重组蛋白的生物学活性检测*
1 1 2 1 1 1 1
宏梅 , 胡敬东 , 马凤龙 , 郑玉姝 , 刘翠艳 , 田兆菊 , 赵宏坤 **
(1. 山东 业大学动物科技学院，泰安27 1018 ；2. 山东信得药业, 青岛266061)
： ，经亲和层析法对表达
摘要 对含有鸡白细胞介素- 18( )基因的质粒在大肠杆菌( ) 内进行诱导表达
产物进行纯化，用微量细胞病变抑制法CEF-VSV 系统，检测其对SPF 鸡脾淋巴细胞诱导产生 - 干扰素(IFN- ) 的活性和其
；用3 。结果表明，经
对病毒的抑制效果 H-TdR 掺入法和MTT 法分别检测其对T 淋巴细胞诱导转化和NK 细胞杀伤活性的作用
诱导表达出分子量44 kD 的目的蛋白(与GST 融合表达) ，纯化后得到去除菌体蛋白的高纯度目的蛋白；该蛋白能够诱导脾细
，可达 6
胞产生IFN- ，当浓度为250 ng/mL 时诱导IFN- 的活性最高 1伊10 U/mL ；但该蛋白不能直接抑制水疱性口炎病毒
(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上生长；能够刺激淋巴细胞显著增殖，浓度为250 ng/mL 时效果最佳；适当浓度的rChIL-18 蛋白
能促进NK 细胞的杀伤活性，浓度为 150 ng/mL 时，作用最强。利用原核表达的重组鸡白细胞介素-18 蛋白与天 鸡IL-18 蛋
白一样具有较广泛的生物学活性。
： ；纯化；生物学活性
关键词 鸡白细胞介素-18；原核表达
中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 1006-1304(2007)01-0005-06
: : :
Biological Activity Assay of Purified Expression Product of
Recombined Chicken Interleukin- 18 Gene in
1 1 2 1 1 1
LI Hon
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