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姜黄素对人肝癌细胞BEL7402中HIF1α表达的影响.pdf
Bulletin2006 ·1379·
中国药理学通报Chinese Nov；22(11)：1379～83
Pharmacological
0【表达的影响
姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中I-IIF-1
孙军，李岩
(中国医科大学附属二院消化内科，辽宁沈阳 110004)
中国图书分类号：R282．71；R329．2；R394．2；R73—351； 水平口]，那么HIF．10L在其中扮演什么角色，目前还
R735．702．2：R979．1
文献标识码：A文章编号：1001—1978(2006)11—1379—05
Blot方法，观察姜黄素在缺氧环境下，对人肝癌细胞
0【
摘要：目的探讨姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF一1
株BEL-7402中HIF一1o【mRNA与蛋白表达的影响以
表达的影响以及蛋白酶体在其中的作用。方法 以0、2．5、
及蛋白酶体在其中的作用，从分子水平上探讨姜黄
5、10、15、20
I上mol·L“的姜黄素处理人肝癌细胞BEL一7402
素抗肿瘤血管生成的作用机制。
缺氧环境中培养6h，WST一8法和台盼蓝染色法分析细胞增
1材料与方法
殖和活力，采用RT—PCR和WesternBlot方法检测肝癌细胞
1．1试剂和抗体RPMI
申．HIF一1
0【的表达；以0、10IJJmol·L。1姜黄素、10I,Lmol·L。1
公司产品；胎牛血清为中国医学科学院生物工程研
MG一132、10I上mol·L“姜黄素+10I．Lmol·L～MG一132处理
究所产品；姜黄素为Sigma公司产品，溶于少量DM—
人肝癌细胞BEL-7402缺氧环境中培养6h，采用Western
sO中，配制成500
Blot方法检测肝癌细胞中HIF一10【的蛋白表达。结果①不 I山mol·L。1的水溶液，用培养液稀
同剂量的姜黄素对肝癌细胞活力和增殖率的影响与对照组 释成所需浓度，DMSO的终浓度小于0．1％；蛋白酶
相比差异无显著性；②随着姜黄素浓度的增加，HIF-ld蛋白
表达逐渐降低；③不同剂量的姜黄素对HIF-1dmRNA表达
的影响与对照组相比差异无显著性；④MG一132能够逆转姜国Santa
黄素对HIF．1d蛋白的减少。结论姜黄素抑制人肝癌细胞同仁化学研究所提供；TaqDNA聚合酶、逆转录试
BEL-7402中HIF-loL蛋白表达是通过转录后机制和蛋白酶
剂盒为TaKaRa产品，引物由大连宝生物工程有限
体途径。
公司合成
1．2方法
关键词：姜黄素；缺氧诱导因子一1；人肝癌细胞BEL-7402
1．2．1
中国医科大学细胞生物学教研室提供。肝癌细胞
肿瘤最主要的特征是肿瘤细胞的失
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