波动性高糖下血红素加氧酶-1对INS-1细胞保护作用的的研究.pdf

褂… ㈡鼎嬲 波动性高糖下血红素加氧酶．1对INS．1 细胞保护作用的研究 硕士研究生：陈毅光 指导教师：薛耀明教授 摘 要 【背景】 目前，全球范围内糖尿病的患病率正迅速增长。糖尿病已成为继心血管病 和肿瘤之后的第三大非传染性疾病。糖尿病及其并发症可引起多系统损害，具 有较高的致残率和致死率，严重威胁人类健康，并给家庭和社会带来沉重的经 济负担。因此，糖尿病的防治已经成为日趋重要的公共卫生学问题，而该问题 的解决有赖于对糖尿病的病因及发病机制进行深入探讨。一般认为，胰岛B细 胞功能障碍是糖尿病发生、发展的关键环节之一，对其相关机制加强研究具有 重要意义。 既往研究提示，慢性高血糖可以造成胰岛B细胞功能障碍和凋亡，即所谓 的“葡萄糖毒性”。进一步的研究提示，氧化应激是造成胰岛p细胞“葡萄糖毒 性”的重要机制之一。一般而言，氧化应激往往是指由于活性氧簇(ROS)产生 速率超过其被清除的速率，引起ROS的过度蓄积，最终造成细胞损伤和功能障 碍的现象。大量体内外研究表明，慢性高糖可引起ROS及氧化应激相关标记物 水平显著增加，而积极的抗氧化处理则对胰岛B细胞具有保护作用。波动性高 血糖是临床上糖尿病患者慢性高血糖较为常见的表现形式，其又往往表现为未 经合理控制的餐后高血糖。研究表明，餐后高血糖是血管并发症的独立危险因 素，进一步的研究发现，波动性高糖可能比稳定性高糖产生更显著的氧化应激， 中文摘要 从而对血管内皮细胞造成更大的损伤，最终可能促进糖尿病慢性并发症的发生、 发展。因此，波动性高糖可能比稳定性高糖产生更大的损害，但波动性高糖对 胰岛13细胞氧化损伤的报道尚不多见，对这方面内容进行研究具有重要意义。 研究表明，胰岛13细胞凋亡增加所致的13细胞数量减少是引起胰岛功能障 碍的重要机制之一。因此，B细胞凋亡可能在糖尿病发生、发展过程中起着重要 的作用。在众多诱导13细胞凋亡的因素当中，高血糖受到了普遍关注。大量研 究表明，稳定性高糖可促进胰岛13细胞凋亡的增加。而在胰岛13细胞凋亡的基 因调控中，Bcl．2基因家族可能起着重要的作用。在稳定性高糖干预下，胰岛13 细胞内促凋亡基因Bax表达显著增加，而抗凋亡基因Bcl．2表达则明显下降，提 示Bcl．2／Bax的表达变化可能参与高糖介导的B细胞凋亡的调控。近年来发现， 氧化应激与细胞凋亡之间关系密切。有研究提示高糖可通过引起显著的氧化应 激加重血管内皮细胞凋亡。多项体内外研究亦表明，氧化应激可诱导胰岛13细 胞凋亡，经抗氧化处理后可抑制凋亡，下调促凋亡蛋白Bax表达并促进抗凋亡 蛋白Bcl．2表达。因此，稳定性高糖可通过增强氧化应激促进B细胞凋亡的增加， 并下调胞内Bcl．2／Bax表达比值。 如前所述，包括胰岛13细胞在内的组织细胞可受到氧化应激和各种促凋亡 因素的损害，但机体本身亦存在着相关的防御保护系统来拮抗这种损害。血红 素加氧酶．1(heme oxygenase—l，HO．1)便是近年来日益受到关注的一种细胞保 护蛋白。HO．1广泛分布于哺乳动物多种组织细胞的微粒体内，生理情况下表达 量较低，但在多种引起氧化应激的因素诱导下，其表达量和活性可显著增强。 目前认为，HO．1是机体内重要的抗氧化保护因子之一，其诱导性表达增高被视 为组织细胞对氧化应激等损伤因素的适应性保护反应。近年来的研究还表明， HO．1的适应性高表达可在一定程度上反映糖尿病高糖条件下的氧化应激状态。 研究提示，上调HO．1的表达具有拮抗氧化应激的防御保护作用，HO．1的 这种保护作用在包括器官移植、缺血再灌注损伤、心脑血管疾病等多个领域已 经成为研究热点。既往研究显示，高糖可促使血管内皮细胞氧化应激增强，而 II 硕士学位论文 通过上调HO．1表达则可有效拮抗高糖所致的氧化应激，相反地，下调HO．1表 达则加剧氧化应激。有关胰岛细胞的研究表明，在稳定性高糖干预下，诱导HO．1 表达增高可有效降低INS．1细胞的ROS水平，并改善胰岛素分泌功能，提示在 高糖条件下，HO．1可能通过拮抗氧化应激而发挥保护胰岛13细胞功能的