河南食管癌高发区单发食管癌、贲门癌及同一个体食管%2f贲门双源癌人乳头瘤病毒检测和p53、p16、p21WAF1及MDM2蛋白变化的研究.pdf

中文摘要 河南食管癌高发区单发食管癌、贲门癌及同一个体食管／贲门 蛋白变化研究 博士研究生丁广成 导 师王立东 郑州450052 摘 要 1．研究背景与目的 食管癌(Esophageal 省林州地区(以前林县)是世界上发病率最高的地区，组织类型以食管鳞癌 cell (Esophagealsquamous 者5年存活率仅为10％，早期患者5年存活率可达90％。目前为止，高发的原 因尚未清楚。以往的研究认为：高发区主要分布在发展中国家，常常因为饮食 结构单一，缺乏足够的绿色蔬菜和新鲜水果的摄入，导致维生素、抗氧化剂和 微量元素缺乏，再合并摄入致癌剂如亚硝胺或含真菌的霉变食物时，就容易导 致食管癌的发生。食管粘膜是外界环境因素频繁接触的部位，是一个外来物进 入体内的重要通道。这些外来物中，包括一些病原微生物，化学致癌物，食品 添加剂和环境污染物等。多年的流行病学调查及实验研究表明某些微生物与消 化道肿瘤的发生关系密切。 中文摘要 人乳头瘤病毒(Human 首次报道以来，HPV感染与食管癌发病之间的关系逐渐引起人们的重视，相关 的报道越来越多。来自不同国家及地区报告食管癌中人乳头瘤病毒的检出率相 差很大，甚至相悖，最低及最高HPV检测率均来自河南林州食管癌高发区，除 此之外，国外的南非和印度HPV感染率报告也较高。而在欧洲与北美的一些发 达国家，HPV在食管癌中的检出率较低。以往研究所用的检测方法主要有针对 多聚酶链式反应(PCR)，或者针对抗体的血清学检测。 对这些不同的检测结果，多数人倾向认为可能与地域不同、检测方法不同 以及取材部位不同有关，但对采用相同的检测技术，若标本的来源形式不同， 检测结果是否有差别却很少有报道。 通常所说的贲门是指胃食管交界线以下2cm的范围，解剖结构与生理功能 上与食管有很多相似之处。在食管癌高发区一个显著的流行病学特征是贲门腺 癌(Gastriccardia 低，这种现象也见于其它食管癌高发区。 chainreaction，PCR)，对 本研究旨在通过应用聚合酶链式反应(polymerase 不同组织来源形式(新鲜组织与石蜡固定组织)的单发食管癌、贲门癌标本进 行检测，同时以高发区胃镜食管粘膜活检组织作对照，分析HPV检测差异产生 的可能原因。在此基础上，借助本地独特的食管／贲门双源癌这一病例优势，进 对食管贲门癌变机理，食管贲门癌高易感性分子机制，肿瘤多中心起源理论的 了解，特别是为进一步回答该地区食管鳞癌和贲门腺癌并存高发是否具有相似 的致癌危险因素和癌变分子基础等方面提供一些理论依据。 2．材料与方法 2．1研究对象 Ⅱ 中文摘要 食管癌患者：共44例，来自河南省林州市食管癌医院及林州市中心医院(男 26例，平均年龄594．7；女18例，平均年龄564．9)。术后病理检查均为食管鳞癌。 贲门癌患者：共】8例，来自河南省林州市食管癌医院及林州市中心医院(男 石蜡固定组织：与新鲜食管癌组织对应的石蜡固定组织30例(男18例， 鳞癌3例，中分化鳞癌23例，低分化鳞癌4例；合并有淋巴结转移20例，无 淋巴结转移10例。 食管／贲门双源癌组织：共17例，来自河南省林州市中心医院，姚村食管癌 接受放疗和化疗。 健康对照组：共18例，来自食管癌高发区无症状普查居民(男9例，平均 管炎及食管各级癌前疾病。 2．2标本的收集和处理 各种手术切除标本均一分为二，一半固定；一半冰冻(--80℃)，常规组织 学处理，光镜观察，备用。 2．3方法 2．3．1新鲜组织DNA的提取： DNAmini 新鲜组织DNA采用