重组鸡γ_干扰素在昆虫细胞中的高效表达.pdfVIP

卷 期 ! 微 生 物 学 报 ’( )! 0’ ) 年 月 #$$ %$ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,’-./ #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 重组鸡 干扰素在昆虫细胞中的高效表达 ! ! 孔桂美 许金俊 秦爱建 金文杰 刘岳龙 （扬州大学 江苏省动物预防医学重点实验室 扬州 ##$$6 ） 摘 要：将鸡 干扰素（ ）基因克隆到载体 中，构建转移载体 ，然后转化 4 IJK704 L7MN1OMI% L7MN1OMI%4IJK704 ! ! ! PQ%$O8+ 感受态大肠杆菌，通过位点特异性转座，将IJK704 基因整合到O8+;C 穿梭载体中，构建表达质粒O8+;C4 ! ；通过脂质体将表达质粒转染 昆虫细胞，用间接免疫荧光试验鉴定重组鸡 干扰素（ ）的表达； IJK704 NR6 4 /IJK704 ! ! ! 通过水泡性口炎病毒感染鸡胚成纤维细胞（ ）的细胞病变抑制试验，检测 的活性。研究结果表明，感染 I:7 /IJK704! 重组杆状病毒的 细胞能高效表达 ，且当每个细胞的感染量为 个病毒时，细胞在感染 后， NR6 /IJK704! % 63J /IJK704! 基因表达产物的活性最高，达到 3 5 T# 。以 进行对新城疫病毒（ ） 株、禽流感 病毒 %$ S %$ UV;W /IJK704! 0P 7!2:2 Q0% （ ）和马立克氏病病毒 （ ） 株的抗病毒活性试验，发现 对 和 株病毒有明显 MK4Q XP YM /IJK704! MK4Q XP YM 的抑制其致细胞病变作用，但对0P 7!2:2 株病毒在体外不能抑制其致细胞病变作用，仅能在病毒滴度上表现抑 制效果。 关键词：重组鸡 4干扰素，杆状病毒，表达，抗病毒作用 ! 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Z52 M $$$%43#$6 #$$ $4$3654$ 鸡 干扰素（ ）是由活化的 细胞和 菌（ ） 由本室保存。 4 I