DNA检测中琼脂糖凝胶重复使用效果.pdfVIP

2011年第27卷第 1期 包 头 医 学 院 学 报 V0l-27 No．1 2011 JOIRNAL 0FBAOTOUMEDICAL COLLEGE 15 DNA检测中琼脂糖凝胶重复使用效果 秦艳晶 高丽君 秦文斌 (包头医学院基因诊断研究所，内蒙古 包头 014010) 摘 要 目的：摸索在 DNA检测中琼脂糖凝胶多次重复使用的效果。方法：按常规制备琼脂糖凝胶 ，胶不离框 ，上 样 、电泳，电泳后胶连框一起放于饭盒内，盖好盒盖 ，于4 冰箱保存。下次使用时保证电泳方向与前次相反，即把胶调 转方向加样、电泳。结果 ：重复使用6—7次，DNA条带仍清晰可见。结论：这是一种简便易行、效率高、节省实验经费并 易于推广的好方法。 关键词 DNA；检测；琼脂糖凝胶；重复使用；电泳 TheReuseofAgaroseGelinDNA Detection QINYanjing，GA0Lijun，QINWenbin (GeneDiagnosislnsthuteofBaotouMedicalCoaege，Baotou014010，China) Abstract Objective：TofindoutasimplemethodforthereuseofagarosegelinDNAdetection．Methods：Agarosegelwas preparedbyconventionalmethod，andthenthesampleswerelo~edintotheslotof thege1．Afterelectmphoresis，theagarosegel withthemoldwasputintoalunchbox．andwasstoredin4 ℃ refrigerator．Theelectrophoresisdirectionshouldbeoppositeto theprevioustimewhenhtegelwasreused．Results：Theagarosegelcouldbereusedabout6—7times，andtheDNA bnadswere stillclearlyvisible．Conclusion：Themethod issimple，efficient，economynadeasytopopularize． Keywords DNA；Detection；Agarosegel；Reuse；Electrophoresis 琼脂糖凝胶电泳是核酸研究工作中不可缺少的重 1．2．2 倒胶 将胶槽置于水平支持物上，插上样品梳 要分析手段，它广泛应用于基础理论研究、农业科学、 子。向冷却至60℃左右的琼脂糖胶液 中加入溴乙锭 医药卫生、工业生产、国防科研、法医学和商检等许多 50 ，混匀，倒人胶槽 内，使胶液形成均匀的胶层。室 领域。虽然很多参考书上均有该方法的介绍，但实际 温 自然冷却，待胶完全凝固后，置于饭盒内盖好盒盖， 操作中的一些技巧是无法从书本上获得的。琼脂糖凝 于 8oC冰箱内放置约 10rain。从冰箱取出胶后再拔掉 胶重复使用是核酸研究实验室力行解决的实际问题 。 梳子备用。注意不要损伤梳底部的凝胶。 因为反复制胶既费时又费力，浪费经费。本文介绍琼 1．2．3 加样 将扩增好的PCR产物 12 直接加人 脂糖凝胶电泳重复使用的简易方法，这些经验源 自多 梳子孔中，再用 0．5XTBE缓冲液补满加样孔。 年的教学、科研实践，操作简便、节省经费、电泳条带清 1．2．4 电泳 连胶带框一起放入 电泳槽内，用纱布搭 晰，结果容易判定，能满足生物化学和分子生物学的教 桥。接通电源 ，电压一般为 5～15V／cm。电泳 20～ 学科研的实验需要，并已在我院研究生教学和科研 中