基于响应面法优化红曲霉菌丝体中红色素的提取工艺.pdfVIP

辽宁农业科学 20ll(1)：2O一24 LiaoningAgriculturalSciences 文章编号 ：1002—1728(2011)叭 一0020—05 基于响应面法优化红曲霉菌丝体中红色素的提取工艺 王 红 ，李冰宇 ，肖 军 ，肇 莹 ，王 娜 ，陈 殉 ，丛 玲 ，杨 涛 (1．辽宁省农业科学院，辽宁 沈阳 110161； 2．沈阳农业大学，辽宁 沈阳 110161) 摘要 ：以突变株红曲霉(MonascusrubberYT1)发酵后菌丝体为原料 ，优化其红 曲色素的提取工艺，采用单因素 试验对影响红 曲色素提取的三个主要影响因素进行 了考察 (乙醇体积分数、提取时间、提取温度)。以红曲色 素的色价为指标 ，对三因素进行 Box—Behnken响应面优化 ，得到二次多项式 回归方程预测模型 ，对方程进行最 优值求解 。结果表 明菌丝体 中红 曲色素的最佳提取工艺条件为 ：乙醇体积分数 90％ ，浸提时间 100min，浸提 温度 62℃ ，最优色价值达到799．2(U／g)，与预测值误差为 0．467％。 关键词：红曲色素 ；响应面法分析 ；Box—Behnken设计 中图分类号 ：TS201．1 文献标识码 ：B 红曲色素及制品主要用于医药、食品、日用化 取工艺条件 ，并且经过三次重复验证 ，色价平均值 工 、酿造领域 ，在 肉制品、饮料、食品、酱油、红醋、 达到799．2(U／g)，与预测值误差约为0．467％。 化妆品中也广泛使用 ，代替人工合成红色素 ，红曲 1 材料与方法 色素具在其他天然色素无法比拟的优势 。此 1．1 材料 外 ，红曲色素是 目前 肉制品中亚硝盐的最好替代 品，除赋予 良好 的肉红色外 ，还能减少亚硝盐用 红曲霉 (MonascusrubberYT1)由辽宁省农业 量 ，增加安全性 ，提高香肠颜色对光和氧气的稳定 科学院创新中心实验室提供。 性 ，因此 ，国内外一直致力于此方面的研究 。 1．1．1 红 曲菌丝体制备 响应面优化法，即响应 曲面法 (Response 将活化斜面接种至三角瓶 中(500m1)，温度 SurfaceMethodology，RSM)，这是一种实验条件寻 28cI=，转速 160r／min，发酵培养 10d，过滤菌丝 优的方法，适宜于解决非线性数据处理的相关问 体 ，于 80℃烘箱中，约2h至干。 题 。它囊括了试验设计 、建模 、检验模型 的合适 1。1．2 色素 色价 的测定方法 性 、寻求最佳组合条件等众多试验和统计技术； 取 1g菌丝体 ，充分研磨 ，加 10ml乙醇溶液， 通过对过程的回归拟合和响应曲面、等高线 的绘 在一定温度水浴锅中放置数小时，得菌丝体红曲 制 、可方便地求 出相应 于各 因素水 平 的响应 色素溶液。过滤 ，取 1ml滤液 ，加 乙醇9ml混匀， 值 。在各因素水平的响应值基础上 ，可以计算 以乙醇溶液为空 白，测定滤液 OD505Nm值 ，乘 以 出预测响应最优值 以及相应 的因素变量。Box— 稀释倍数 ，即得到菌丝体红 曲色价 (U／g)。试验 Behnken简称 BBD，也是响应面优化法常用 的实 重复3次，结果取平均值 。 验设计方法。 1．2 单 因素试验 本实验对菌丝体红 曲色素提取过程中影响色 为了探索各种影 响因素的变化规律 ，首先进 价的三个主因素进行了单因素试验 (溶剂纯度、 行单因素试验 ，红色素提取过程 中主要影响因素 浸提时间、浸提温度)，然后 以色价值为响应指 乙醇体积分数 、提取时间和提取温度为考察因素 ， 标 ，通过响应面法 (BBD)优化，