连接酶链反应技术在淋球菌与沙眼衣原体检测中的应用.pdfVIP

中国国境卫生检疫杂志2003 年 2 月第 26 卷第 1 期　Chin J Frontier Health Quarantine Feb. 2003 , Vol 26 , No. 1 ·43 · 〔实验研究与疾病监测〕 连接酶链反应技术在淋球菌和 沙眼衣原体检测中的应用 ( ) 叶 　巍 　方 　筠 　田桢干 　张晓航 　上海国际旅行卫生保健中心 上海 　200335 　　摘要 　〔目的〕　研究 1 种既高度敏感又高度特异的淋球菌和沙眼衣原体的实验室诊断方法。 〔方法〕　采用 ( ) 连接酶链反应技术 LCR 对受检者的尿液标本进行淋球菌和沙眼衣原体的检测。 〔结果〕　在 1 128 份标本中 ,共检 测出淋球菌阳性样品 8 份 ,阳性检出率为0. 71 % (8/ 1 128) ,沙眼衣原体阳性标本 38 份 , 阳性检出率为 3. 37 % (38/ ) ( ) 1 128 ,其中共有 5 份标本为淋球菌和沙眼衣原体双阳性标本 ,阳性检出率为0. 44 % 5/ 1 128 。 〔结论〕　作为 1 种 探针检测技术 ,连接酶反应技术可用于淋球菌、沙眼衣原体等多种病原体的实验室检测。 关键词 　连接酶链反应 ;淋球菌 ;沙眼衣原体 ; 〔中图分类号〕R759 　〔文献标识码〕B ) 　　淋球菌和沙眼衣原体是淋病和非淋球菌性尿道 chomatis LCx 配套检测试剂盒。 炎等性传播疾病的主要病原体 ,传统的实验室诊断 2 　实验方法 方法为分泌物涂片检查、分离培养等。由于标本采 ( ) ( ) 集对受检者 尤其是男性病人 具有一定的创伤性 , 2 . 1 　前处理 　将新鲜收集 24h 内4 ℃保存 或低温 ( ) 加之病原体的生物学特性使得检测的阳性率较低。 保存 60d 内20 ℃保存 的尿液标本以尿液前处理试 因此 ,对淋球菌和沙眼衣原体的实验室诊断一直是 剂盒进行破细胞、提取 DNA 处理。 医学检验界关注的一个领域。笔者采用美国雅培公 2. 2 　扩增 　将处理好的样品 DNA 分别加入试剂盒 ( ) 司 Abbott 生产的LCx 全自动连接酶链分析仪 ,结合 内已配制好的淋球菌和沙眼衣原体扩增反应混合 ( ) 连接酶链反应技术 Ligase Chain Reaction , LCR 和微 液 ,进行 PCR 扩增。反应条件为 :93 ℃变性 1s ,59 ℃ ( 粒子酶免疫技术 Microparticle Enzyme Imm