小麦赤霉病菌定性和定量ELISA检测方法的建立.pdfVIP

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维普资讯 ‘ T ● ll|llCULTURilE 华北农 学报 ·2007,22(1):178.181 I●哪 LI-|lglCI 小麦赤霉病菌定性和定量 ELISA检测方法的建立 李潮霞 ,田世民 ,马 平。,杨文香 ,李社增。,刘大群 (1.河北农业大学 植物保护学 院,河北 保定 071001;2.中国检验检疫科学研究院,北京 100025 3.河北省农林科学院植物保护研究所 ,河北 保定 071000) 摘要 :以3株小麦赤霉菌 (禾谷镰刀菌 BDX4.5,BDX3.2,HwH4.5)的混合菌体蛋白为免疫原 ,制备多克隆抗体 ,建立 了检测小麦赤霉菌的间接 ELISA法。结果表 明,小麦赤霉菌抗血清 的效价为 1:640000,灵敏度为 0.005 g/mL。由 ELISA法测定的结果可知,此抗体可以与镰刀菌发生特异性反应 ,而与其他供试 的病原真菌的菌体蛋 白呈阴性反应。 对 田问人工接种 的小麦籽粒进行 了ELISA定量测定 ,病菌的生物菌量与病害的发病程度相符合。 关键词 :小麦赤霉病 ;多克隆抗体 ;酶联免疫检测法 中图分类号 :s512.0l 文献标识码 :A 文章编号 :1000—7091(2007)0l一0178—05 DevelopmentofQualitativeandQuantiattiveELISATestforFusarium gramineurum inW heat 。 LIChao—xia ,TIAN Shi—min,MA Ping ,YANGWen.xiang ,LIShe—zeng ,LIU Da—qun (1.CollegeofPlantProtection,HebeiAgriculturalUniversity,Baoding 071001China; 2.ChineseAcademyofInspectionandQuarantine,Beijing 100025,China;3.Instituteof PlantProtection,HebeiAcademyofAgricultureandSciences,Baoding 071000,China) Abstract:Polyclonal antibodywasdevelopedagainstcompoundantigenspreparedfrom threeFusarium gramineurum isolates(BDX3—2,BDX4.5,HwH4—5),thecausalagentofwheatscab,nadanimmunoassayforqualitativenadquanti— tativedetectionofthepathogenwasestablished.Theantibodyshowedthehighesttitreat1:64000,andthegreatestsen— sitivityat0.005ttgnatigen/mL inELISA.Highreactivitywasobservedwith Fusarium spp.pathogens,whereas noCroSS— reactivitywithotherthirteenfungitested inELISA.BiomassofF.gramineurum inthe infectedwheatseedsWas quanti· fledbyusingtheELISA,andtheamountofthepathogenprimarilyagreedwiththediseaseseverityassessedvisually. Keywords:Fusarium graminearum ;Polyclonal antibody;Enzymelinped immunoserbentassay 小麦赤霉病是 由多种镰刀菌 (Fusarium spp.)引

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