猪脑组织总神经节苷脂提取纯化工艺的研究.pdfVIP

维普资讯 一 一 8 氨基酸和生物资镩 f驰 1 AminoAddl＆ 0血 Resourcesl996．18 (4)：5～8 猪脑组织总神经节苷脂提取纯化工艺的研究 ‘ 高剑峰 王会文I冯万祥 华东道工天 亿薪丽 上海 200237 }l 摘要 本文较详细地研究论述了神经节苷脂 (GLs)的提取纯化工艺。从猪脑组织中用苹取法获得 GIs后 t用多孔型弱碱性离子交换树脂 335和强碱性离子交换树脂 717对其进行分离纯化 ，并对工艺过 程及产品品质进行 了分析和 比较研究 ，实验证明：335离子交换层析分离Gls，得率 65·9mg／100g湿组 织 ，纯度 80．3 ；717离子交换层折分离GIs，得率 77．4mg／100g湿组织t纯度 76·9 f从工 艺过程及 产品品质而言，采用多孔型弱碱性离子交换树脂分离提取Gls，具有一定的经挤价值。 糕词坚●———————————一 她 龇塑一欲…… … J～Xlr 神经节苷脂可从多种动物组织 中提取。以 丙酮、氯仿 、甲醇：国产化学纯；硅胶 60 猪脑组织为提取材料的研究较为少见，在猪脑 H ：EMarek进 口分装； 组织 中，GM1，GM3，GDla，GDlb和 GT1b的 弱碱性离子交换树脂 335．、强碱性离子交 含量较高，各种成分的含量百分比接近牛脑，而 换树脂 7l7 华东理工大学华震公 司提供 ； 与人脑有较大的差别口]，主要表现是 GM1和 猪脑 ：取 自龙华屠宰场； GDlb的含量 明显高于人 脑 ，在各种 Gls中， 离心机 ：江苏太仓实验仪器厂 ； GM1和 GTlb对神经突起生长的促进较大 ， 1．2 实验 方法 ： 值得注意的是 GMl对 中枢神经系统损伤的治 1．2．1 猪脑的预处理及丙酮粉的制备：新鲜猪 疗作用是近年药理学领域 的一个创新，可 改 脑小心分离除去脑膜，分别加入 3倍体积的冰 善脑功能的多种参数 ，是医学研究的一个有价 冻酮 ，0C用组织捣碎机捣碎 ，2000rpm ，lmin， 值的新工具。GDla在神经元树 突中起和轴突 其 问问隔3min，共离心 3次，过滤 ，用 2倍体 分支 以及建立功能性突触 中起重要 的作用0]， 积丙酮洗涤滤饼，充分减压抽滤后 ，置真空干 猪脑 中GMltGDla，GD1和 GTlb含量较丰 燥器中充分于燥后得丙酮粉冷藏备用。 富，提示猪脑Gls制剂可能成为治疗神经系统 1．2．2 组织总脂的抽提：在丙酮粉依次分别用 疾病的理想制剂，显示 出良好的应 用前景。由 5倍体积 4 ℃的氯仿 (c)、甲醇 (M)混台液 于Gls的人工合成 尚存在各种 问题和困难，因 C ：M 一2 ：1；C ：M — l：1；C ：M 一 1：2(V 此 ，从组织 中提取 G1S，到 目前为止仍然是获得 V)抽提并减压过滤 ，合并所有滤液+静置过夜 Gls的重要途径 本文将探讨用离子交换树脂 后过滤，加入氯仿使滤液C M一2：1备用。 替代进 口离子交换凝胶来分离 Gls的基本方 1．2．3 Floeh分配法提取总 Gls口]：将上述抽 法，这在 国内外尚未见报道 。 提液加入 0．2体积的蒸馏水或稀盐溶液混匀静 置待分层 ，虹吸收集上的部水相 。合并上层水 1 材料及方法