莲心碱对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织中一氧化氮和一氧化氮合酶的影响.pdfVIP

长江大学学报 (自然科学版) 2009年 12月第 6卷 第 4期：医学 JournalofYangtzeUniversity(NatSciEdit) Dec．2009，Vo1．6No．4：Medicine ·3 · doi：10．3969／j．issn．1673—1409(R)．2009．04．002 莲心碱对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织中 一 氧化氮和一氧化氮合酶的影响 余万桂 ，邓德明，张恒文 (长江大学医学院，湖北荆州434023) 杨 涛 (荆州市中医医院内科，湖北荆州434023) 张道明，刘 莲 (长江大学医学院，湖北荆州434023) [摘要] 目的：观察莲心碱对大 鼠局灶性脑缺血 ／再灌注损伤后脑组织一氧化氮 (NO)含量和一氧化氮合 酶 (NOS)活性的影响，为莲心碱治疗脑缺血提供实验依据 。方法：线栓法阻塞大 鼠大脑 中动脉 2h／再灌 注 24h制备大 鼠脑缺血再灌注损伤动物模 型。24只 SD雄性大鼠随机分为 3组 ：假手术组、缺血再灌注组 和莲心碱 (3rag／kg)组 ，分别于术前 30rnin、再灌注即刻、再灌注 12h舌静脉注射莲心碱 3mg／kg。再灌 注 24h后处死大 鼠，取脑组织以硝酸还原酶法测定脑组织 中的N0水平，以化学 比色法测定总NOS活性， 并测定诱导型一氧化氮合酶 (iN0s)活力。结果：大 鼠脑缺血 2h、再灌注 24h后，脑组织 N0水平显著 升高，总NOS和 iNOS活性显著增加 ，莲心碱可显著降低缺血再灌注损伤大鼠脑组织 N0含量和总NOS、 iN0S活力。结论 ：莲心碱可能通过降低 N0对脑缺血再灌注损伤后 的神经毒性作用而发挥脑缺血 的保护 作用。 [关键词]莲心碱；脑缺血 ／再灌注损伤；一氧化氮；一氧化氮合酶 [中凰分类号]R364．12 [文献标识码]A [文章编号]1673一l409(2009)O4一R003一O3 一 氧化氮 (No)以I一精氨酸为底物 ，在一氧化氮合酶 (NOS)催化作用下生成，是一种重要的信 使分子 ，参与多种疾病 的病理生理过程 ，在脑缺血再灌注损伤 中起重要作用L】]。莲心碱是从中药莲子芯 中提取分离得到的双苄基异喹啉类化合物，具有降压、抗心律失常等心血管活性口一，文献报道与莲心碱 同属莲子心主成分的另一生物碱——异莲心碱对实验性脑缺血损伤和脑缺血 ／再灌注损伤均具有保护作 用 ，其保护作用可能与它抗氧化和抗 自由基损伤有关[3]。同时我们在实验中观察到莲心碱对脑缺血有保 护作用L4]。本实验观察莲心碱对大鼠局灶性脑缺血 ／再灌注损伤后脑组织 No水平和 NOs活性的影响， 为莲心碱治疗脑缺血提供实验依据。 1 材料与方法 1．1 材 料 1．1．1 实验药物 莲心碱 由武汉大学药学院药物化学研究室提供 (含量为 96．8 )，为微黄色结 晶， 实验时，加 lmol／L盐酸溶解 ，再以0．1mol／L氢氧化钠将 pH调至 5．8，置冰箱内保存备用。 1．1．2 动物 大鼠，SD种，一级 ，雄性，体质量 200~240g，由华中科技大学 同济医学院实验动物中 心提供 (动物中心许可证号为 SYXK (鄂)2004—0028，动物合格证号为 SCXK (鄂)2004—0007)。 1．1．3 试剂与仪器 No和 NOS测定试剂盒购 自南京建成生物工程研究所 ；756mc紫外分光光度计 。 1．2 方法 1．2．1 动物模型制备与分组 健康雄性 SD大 鼠24只，随机平均分为 3组，即假手术组、缺血再灌注 组和莲心碱组 。3组大鼠分别予以戊巴比妥钠 30mg／kg，腹腔注射麻醉，线栓法制作大 鼠大脑 中动脉闭 塞 (MCAO)／再灌注模型Es]。缺血 2h后轻轻提拉所 留线头至有阻力时再灌注 24h，分别于术前 30rain、 [收稿日期]2009—09—17 [基金项目]湖北省卫生厅科研基金项目 (JXzb74)；长江大学校基金项目 (o5z18o9) [作者简介]余万桂 (1970一)。女。湖北荆州人，副教授，硕士生导师，从事生理学教学与研究工作。 余万桂等：莲心碱对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织中一氧化氮和一氧化氮合酶的影响 第6卷第4期：医学 再灌注即刻、再灌注 12h舌静脉注射莲心碱 3mg／kg，缺血再灌注组舌静脉注射 同等剂量生理盐水 ，假 手术组不给于处理。 1．2．2 脑缺血体积的测量 大 鼠断