通过拆方分析补肾中药配伍对HK2细胞TEMT过程中衰老进程的影响作用.pdfVIP

全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 PU．215 通过拆方分析补肾中药配伍对HK2细胞TEMT过程中衰老 进程的影响作用宰 孙世竹1孙伟2陈燕1秦雪梅1鲍军1·蒋娟娟1申志祥1高雪燕1 1江苏省老年医院2江苏省中医院 210024 【摘要】目的：通过拆方分析补肾中药配伍对人肾近端小管上皮细胞(HK．2细胞)肾小管 上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的影响。方法：制备含药血清，将 HK2细胞随机分为sjRNA干扰组、模型组、补肾中药组、抗纤中药组、中药全方组。通过 RNA干扰抗衰老基因klotho低表达，营造细胞的衰老状态，通过TGF—pl诱导HK一2细胞 白表达，间充质转分化产物纤连蛋白(FN)表达的影响。结果：1、通过RNA干扰抗衰老 基因klotho，从检验结果看到siRNA干扰组、模型组klotho基因RNA及蛋白表达量均较低； 补肾中药组、抗纤中药组和中药全方组与模型组及RNA干扰组比较均有统计学意义，P 0．01：补肾中药组、抗纤中药组和中药全方组三组之间比较RNA表达差异无显著性意义， 蛋白表达上补肾中药组与抗纤中药组与全方组之间比较有显著性差异，P0．05。2、我们 检测HK．2细胞发生TEMT过程中纤连蛋白(FN)的表达水平；抗纤中药组及全方组与模 型组比较有统计学意义，P0．05；补肾中药组与模型组比较没有统计学意义。3、P16(INK4a) 的RNA和蛋白检测结果显示RNA干扰组与模型组比较有显著差异，P0．01，抗纤中药组 及补肾中药组与模型组比较均有统计学意义，P0．05，全方组与模型组比较P0．01；在 基因表达上抗纤中药组及补肾组与全方组比较均有统计学意义，P0．05，蛋白表达上三组 比较无显著性差异。结论：益肾与抗纤配伍复方中药对HK一2细胞TEMT过程有多途径的阻 干扰是成功的，但是用药各组均显示出抗衰老基因表达的增加，说明中药是可以从多种途径 来促进抗衰老基因KLOTHO的表达的增加；2、对于纤连蛋白表达的结果分析，全方组及 抗纤组中药的阻抑作用是显著的，而补肾组中药对于EMT过程的阻抑作用不明显，说明对 于肾脏EMT过程单有补肾中药是不够的，更加证实了复方配伍的重要性：3、p16(INK4a)) 被认为是肾脏衰老的最好标志，可以标志由应激或疾病引起的肾脏早衰的程度。对于衰老基 全国中西医结合发展战略研讨会 第四部分书面交流 因P16的影响，用药各组均有较为显著的阻抑作用，但在P16的RNA表达上全方组作用 更为显著，说明全方中药具有更为全面的疗效。 PU．216 糖肾平对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的实验研究 乌格敦其其格赵宗江张新雪杜磊张丰丰 北京中医药大学 100029 【摘要】目的：探讨糖肾平胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其作用机制。方法：雄 性Westar大鼠，45只，按体重随机分为正常组9只，模型组36只。模型组按45mg／kg 腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)造模，将造模成功的大鼠按体重随机分为模型组、厄贝 沙坦组、糖肾平胶囊小剂量组和糖肾平胶囊大剂量组。每2周称体重，第2、4、8、12、 14周分笼收集24h尿液，检测24h尿蛋白量。用药14周，处死大鼠无菌摘取肾脏，称量 肾重，计算肾重体重比：骨动脉取血，分离血清检测血液生化指标BUN、Scr、TG浓度。 结果：与正常组比较，第4周开始，模型组大鼠体重明显减轻，有统计学差异(P0．01)。与 模型组比较，厄贝沙坦组、糖肾平胶囊组大鼠体质量第6周开始显著增加(P0．01)，肾重 ，体重比显著减小(P0．01)。从第4周开始，模型组大鼠24h尿蛋白定量明显升高，与正 常组比较有显著性差异(P0．01)，后逐渐增加。与模型组比较，厄贝沙坦组、糖肾平胶囊 组第4周后24h尿蛋白定量显著降低(P0．01)，与正常组比较，模型组血清BUN、Scr、 TG含量均明显升高(P0．01)。与模型组比较，厄贝沙坦组、糖肾平胶囊组血清BUN、Scr、 TG含量明显降低(P0．01)，糖肾平小剂量组和大剂量组之间有明显的量效关系。结论： 糖肾平胶囊可能通过降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白、血清BUN、Scr、TG水平，而发挥其对 糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。关键词：糖肾平胶囊，糖尿病肾