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Ghrelin在不同生理期小鼠卵巢的表达.pdf
农技服务,2011,28(5):660—661 责任编辑 胡先祥 责任校对 胡先祥
Ghrelin在不 同生理期小鼠卵巢的表达
杨静,罗英霞,王然,安好峰,方富贵,李福宝
(安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥 230036)
摘要 采用免疫组化PV一9000法和DAB显色技术,研究Ghrelin在不同生理时期小鼠卵巢上的定位。结果表明:在青春期45d小鼠卵
巢原始卵泡上有Ghrelin免疫阳性细胞表达;在妊娠 2d的小鼠卵巢的初级卵泡上有阳性细胞表达;在青春期45d,妊娠2d和8d的小
鼠卵巢的次级卵泡和间质细胞上均出现Ghrelin免疫阳性细胞表达;青春期45d小鼠卵巢黄体 出现阳性表达;妊娠8d的小鼠卵巢的生
殖上皮出现阳性表达。表明Ghrelin可能对小鼠生理周期有一定的调节作用。
关键词 Ghrelin;小鼠;卵巢;免疫组化 ;表达
中图分类号 Q786 文献标识码 A 文章编号 1004—8421(2011)05—660—02
20世纪70年代,Bowers等 合成的growthhormone— 切片厚度为5 m,取2套切片,一套用于免疫组化PV一9000
releasingpeptide(GHRPs),中文称为生长素…。大 鼠和狗 染色,一套作为阴性对照组检测该实验反应的特异性。
Ghrelin则分别是 由胃底 x细胞、A/X样细胞分泌的 。另 1.4 免疫组化染色 免疫组化染色步骤按照免疫组化试剂
据报道 ,在丘脑下部、肾、肺 、肠道、胰腺、胎盘、乳腺、免疫器 盒(北京中衫金桥 ,K102418A)要求进行 一抗为兔抗 Ghre—
官、生殖器官及血浆中均有不同程度 Ghrelin的表达 。免 lin(北京博奥森 ,Bs一1375R)稀释度 l:150,川 DAB 色(北
疫组化显示,Ghrelin的免疫活性神经元在中枢神经系统,主 京中衫金桥,673767A),苏木精复染 ,脱水 ,透明,封片。显微
要分布于下丘脑弓状核 ,在垂体也发现有 Ghrelin免疫活 镜观察 ,阳性产物呈棕黄色 ,阴性对照组片jPBS代替一抗。
性神经元的存在 。由于 Ghrelin在机体 的广泛分布,它可 2 结果与分析
促进 GH的释放 ,但不增加 GH的合成 ,参与能量平衡和生 免疫组化 DAB显色后,Ghrelin的免疫反应阳性细胞
殖系统的调节等。Ghrelin在小 鼠的不同生理周期卵巢上的 深浅不等的棕黄色 ,在青春期 45d小鼠卵巢原始卵泡( 1
定位的研究未见报道,故笔者通过对小 鼠4个不同生理时期 一 A—d)上有 Ghrelin免疫阳性细胞表达 ;在妊娠2d( 2一
卵巢上Ghrelin的定位研究,为进一步阐明其在生殖系统上 A—a)小鼠卵巢的初级卵泡上有阳性细胞表达;在青春期45
的作用及其相关的作用机制提供形态学的基础依据。 d,妊娠2d和8d的小 鼠卵巢的次级卯泡和间质细胞上均jfJ
1 材料与方法 现Ghrelin免疫阳性细胞表达;青春期45d小鼠卵巢黄体 (陶
1.1 试验动物 sF小鼠28只(雌性 18只,雄性4只)由安 1一B—e)出现 阳性表达;妊娠8d的小 鼠卵巢 的生殖上皮
徽医科大学实验动物中心提供。 (图3一D—e)出现阳性表达。在青春期45d小鼠卵巢次级
1.2 样品的采集和处理 取青春期45d,妊娠期2d和 8d 卵上 Ghrelin免疫阳性细胞定位于卵丘 、透 明带(图1一A—
的小鼠进行颈椎脱 臼致死,取小鼠卵巢直接放入4%的多聚 a)。妊娠8d小鼠卵巢的次级卵泡上Ghrelin免疫阳性细胞
甲醛 (0.1MPBS配置)固定 12~24h。 定位于颗粒细胞和卵泡膜 (图3一D—d)。阴性对照上均无
1.3 制备组织切片 将组织进行常规石蜡包埋 ,连续切片, 阳性反应。
注:A(×100)a为次级卵泡、b为间质细胞、12为髓质、d为原始卵泡;B(~400)e为黄体细胞;c阴性对照(X400)
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