热休克预处理提高猪成肌细胞自体正常肌肉移植后的生存率.pdfVIP

中国科学C辑：生命科学 2007年第37卷第3期：271—279 《中国科学》杂志社 SCIENCEINCHINAPRESS http：llwww．scichina．com 热休克预处理提高猪成肌细胞自体正常肌肉 移植后的生存率 杨 圣①②4 LaumonierThomas② MenetreyJacques∽ (①大连大学附属中山医院骨外科，大连116001；②DepartmentofOrthopedic and ofMedicine Geneva，Switzerland) UniversityHospital，CH一1211 muscular 摘要 研究表明成肌细胞移植有可能用于治疗Duchenne型肌营养不良(Duchenne shock 个主要难题．细胞在受到各种刺激后会过度表达热休克蛋白(heat protein，HSP)．体外和体 内实验均已证实HSP能帮助细胞对抗多种有害刺激．本实验针对HSP的过度表达能否提高猪成 h的热休克后会过度表 肌细胞自体正常肌肉移植后的存活率进行研究．猪成肌细胞经过42。C，1 达HSP．通过Westernblot和流式细胞仪来定量检测猪成肌细胞中HSP的表达；同时分析细胞中 的CD56和结合蛋白含量，从而了解休克后细胞的肌源性有无变化．利用放射性H3定量分析移植 Lac z)监测移植后成肌细胞与宿主细胞的融合情 后细胞的生存率．借助慢病毒载体(Lentivector 成肌细胞体内移植后铆=7)，24h时热休克组和非热休克组的细胞存活率无显著性差异((67．69± 8．35)％VS(58．79±8．35)％，P0．05)．48h时热休克组细胞存活率比非热休克组的高2倍((53．32± h时热休克组细胞存活率比非热休克组的高3倍((26．33± 8．22)％VS(28．27±6．32)％，P0．01)．120 胞融合．这些结果提示热休克预处理能增强成肌细胞HSP70的表达，并可提高成肌细胞自体移植 后的生存率．体外热休克预处理是一个简单有效的能改善猪成肌细胞自体移植生存率的方法．这 也许是一个解决成肌细胞移植后存活率低的方法． 关键词 成肌细胞热休克预处理HSP70移植骨骼肌 成肌细胞移植是一种已广泛研究并用于治疗 的x．性连锁隐性遗传型肌病【1，2J．抗肌萎缩蛋白是一 Duchenne型肌营养不良症(Duchennemuscular种棒状细胞骨架蛋白，它位于肌纤维的内表面，并在 保持肌细胞膜的完整和稳定方面起着关键的作用． dystrophy．DMD)E1,2】、心衰‘3，41和严莺肌肉损伤的细胞 移植技术【51． 抗肌萎缩蛋白的缺乏会导致骨骼肌进行性和不可逆 DMD是由位于x染色体上抗肌萎缩蛋白性萎缩．DMD在临床上的特征是：儿童时期进行性 肌萎缩无力，青少年期瘫痪，常在30多岁死于心肺 (dystrophin)基因突变所致的以该种蛋白缺乏为特征