真核基因表达调控5.pptVIP

cAMP response element CRE –binding protein 7.4 翻译水平的调控 翻译起始的调控 未受精卵：隐蔽mRNA(masked mRNA)；受精：招募因子(recruitment factor)，激活隐蔽mRNA 阻遏蛋白的调控：铁结合调节蛋白(regulatory iron-binding protein) 翻译起始因子的调控：eIF-2，血红素对珠蛋白合成的调节 5′AUG对翻译的调控作用：减少正常AUG启动翻译的作用，使翻译维持在较低水平 mRNA5 ′端非编码区长度对翻译的影响。 铁结合调节蛋白 3′ 3′ 翻译起始因子(eIF2)的调控 翻译水平的调控 mRNA稳定性调节 3′端非编码区结构影响其稳定性：3′端富含A和U的结构，引起mRNA 不稳定 蚕蛹羽化成蛾后，需大量蛋白水解酶溶解蚕丝蛋白，mRNA半衰期达100小时，其他仅2.5小时 小分子RNA对翻译水平的影响 7.5 翻译后水平的调控 新生肽链的水解：酶解 肽链N端的第一个氨基酸：稳定化氨基酸（Met、Ser、Thr、Ala、Val、Cys、Gly、Pro）与去稳定氨基酸 肽链中氨基酸的共价修饰：磷酸化、甲基化、酰基化 通过信号肽(signal peptide)分拣、运输、定位 蛋白质合成后的靶向输送（ protein targeting） 蛋白质合成后的去向 留在胞浆 进入核、线粒体或其它细胞器 分泌至体液，输送至靶器官 靶向输送--蛋白质合成后，定向地到达其执行功能的目标地点 分泌性蛋白质(secretory proteins) 穿过合成所在的细胞到其它组织细胞去的蛋白质 信号肽(signal peptide) N-端的一段疏水氨基酸 10～40个氨基酸 把合成的蛋白质移向胞膜并与胞膜结合，然后把合成的蛋白质送出胞外 分泌性蛋白质转运的机制 SRP: signal recognition particles 顺式作用元件（三） 沉默子 沉默子(silencer)：负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 7.2.2 反式作用因子(trans-acting factor) 概念：为DNA结合蛋白，核内蛋白，可使邻近基因开放（正调控）或关闭（负调控） 通用或基本转录因子(general transcription factors)—RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子。 TFⅡA、 TFⅡB、 TFⅡD、 TFⅡE等 特异转录因子( special transcription factors)—个别基因转录所必需的转录因子. OCT-2：在淋巴细胞中特异性表达，识别Ig基因的启动子和增强子。 反式作用因子特点 三个功能结构域：DNA识别结合域(DNA-binding domain)；转录活性域(transcriptional activation domain)；结合其他蛋白的结合域。 能识别并结合顺式作用元件(cis-acting element) 正调控与负调控 功能结构域 反式作用因子结构域的模式 DNA结合域(DNA- banding domain) 锌指结构(zinc finger motif) 同源结构域(homodomain,HD)：螺旋-转折-螺旋(helix-turn-helix) 亮氨酸拉链结构 (leucine zipper) 螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH) 碱性α螺旋(alkaline α-helix) 锌指结构(zinc finger motif) 长约30个aa，其中4个氨基酸（Cys或2个Cys，两个His）与一个Zinc原子相结合。与Zinc结合后锌指结构较稳定。 螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix) 是最早发现于原核生物中的一个关键因子，该结构域长约20个aa，主要是两个α-螺旋区和将其隔开的β转角。其中的一个被称为识别螺旋区，因为它常常带有数个直接与DNA序列相识别的氨基酸。 碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper) 是亲脂性（amphipathic）的α螺旋，包含有许多集中在螺旋一边的疏水氨基酸，两条多肽链以此形成二聚体。每隔6个残基出现一个亮氨酸。由赖氨酸（Lys）和精氨酸（Arg）组成DNA结合区。 碱性亮氨酸拉链结构域转录激活因子 螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH) 该调控区长约50个aa残基，同时具有DNA结合和形成蛋白质二聚体的功能，其主要特点是可形成两个亲脂性α-螺旋，两个螺旋之间由环状结构相连，其DNA结合功能是由一个较短的富碱性氨基酸区所决定的。 螺旋-环-螺旋 反式作用因子结构域的模式 转录活化结构域(transcriptional