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中学生物实验教师培训 陕西师范大学微生物教研室 张双民 中学生物实验教师培训 发酵现象 发酵一般是指利用微生物分解有机质而产生所需物质的现象。即使是使用同一种微生物进行有机物分解，也会发生腐败和氧化等恶变的情况。 例如，啤酒的发酵是啤酒酵母将麦芽汁中的糖分分解成酒精与碳酸气的过程。前半部的旺盛的发酵过程称为主发酵或前发酵。通过主发酵，麦芽汁中的养分大部分已经分解生成了嫩啤酒。将这些嫩啤酒在低温下慢慢熟化就成了啤酒。这个保存过程又称为贮酒或后发酵。 不足之处 该演示实验按课本上的材料和方法做，由于不同地区气温存在差异，成功的可能性不太大，考虑有如下两个方面的原因： 实验材料的选择和用量不明确，实验易失败。 发酵时间长，影响演示效果。按照教学进度的安排，演示时间在冬季，没有考虑为发酵提供适宜的温度。冬天气温低，发酵慢，实验现象不明显，难以在课堂内完成演示实验，需每天观察瓶中的情况。 发酵现象 改进后 以高温型高活性干酵母（发酵温度为38℃--42℃）和葡萄糖粉（葡萄糖可直接发生发酵反应，比蔗糖好）作实验材料，发酵时间明显缩短，可在课堂内完成演示实验； 恒温水浴器的运用，为酵母菌发酵提供了适宜的温度。发酵实验可不再受季节（温度）的限制，增强演示效果。 该实验既演示了发酵产气的现象（气球胀大），也验证了产生的气体为二氧化碳（石灰水变浑浊）。 实验器材 恒温水浴器、铁架台、锥形瓶、玻璃导管、大烧杯（2个）、小烧杯、玻璃棒、试管；高温型高活性干酵母、葡萄糖、澄清的石灰水(熟石灰Ca(OH)2在一升水中溶解1.56克（20℃），它的饮和溶液称为“石灰水”，呈碱性，在空气中吸收二氧化碳而成碳酸钙沉淀 )。 实验原理 在适宜温度下，酵母菌在有氧的情况下，能够把葡萄糖彻底分解成水和二氧化碳，并且释放出较多的能量，供生命活动使用，在没有氧的情况下，酵母菌也能把葡萄糖分解成二氧化碳和酒精，并释放出较少的能量，供生命活动使用。 实验步骤 ⑴ 用大烧杯往恒温水浴器中加入适量的清水，打开电源开关加热，将水浴温度设定为42℃。 ⑵称取100克黄豆芽用1升水煮十五分钟后过滤，将过滤到的1升豆芽水均分到5个500毫升锥形瓶， ⑶在每个盛有200mL豆芽水的锥形瓶中加入5克高温型高活性干酵母，用手振荡致其溶解。 ⑷连接橡皮管和玻璃管，用止水夹夹紧橡皮管，检查其气密性。连接玻璃管和气球，用皮筋或线绳扎紧连接处并检查气密性。 ⑸ 在锥形瓶加入10克葡萄糖，振荡使其溶解再将锥形瓶置于42℃水浴中。 ⑹用手扶住锥形瓶并在瓶口迅速塞上二孔橡皮塞，其中一孔插入一套着气球的玻璃管，另一孔，插入一个“U”形玻璃管，中间接一段橡皮管，用止水夹夹好。将该装置置于42℃的水浴环境中。玻璃管的一端与锥形瓶相通，另一端伸入到盛有澄清石灰水的试管中，用铁夹固定好。 ⑺经过4—5分钟，可见锥形瓶内有气泡冒出，玻璃管上端套着的气球逐渐胀大。松开止水夹，盛有澄清石灰水的试管内变浑浊（产生了白色沉淀）。 检测不同环境中的细菌和真菌 细菌和真菌容易导致人类、动物和植物患上不同的疾病，而通常情况下细菌和真菌的个体很小，单个的细菌和真菌用肉眼是看不到的，只有当它们繁殖形成菌落后，才能看到。我们周围的环境中几乎都存在细菌和真菌。通过本次实验检测环境中的细菌与真菌。 实验内容 实验分组与采样接种方法 培养基制备 平板制作及注意事项 培养及结果观察 实验分组与采样接种方法 制作培养基 牛奶琼脂培养基 称取15克琼脂，剪成小段，置于烧杯中，加入500毫升水，在电炉上加热煮沸至琼脂完全溶解，再加入500毫升牛奶，搅匀后，分装到4个250毫升的锥形瓶中，用棉塞塞好，冷却。将培养皿洗净晾干后，用牛皮纸包好，和培养基一起放到高压灭菌锅中，121℃灭菌30min，取出，冷却。 平板制作 各小组做好分工，并在标签纸上标出组别、实验日期、编号、采集地点，并将标签纸贴在培养皿的底面。将灭过菌的锥形瓶中的培养基加热至溶化后，分别倒到已灭过菌的培养皿中。 制作平板须注意 没倒板之前，不准随意打开培养皿； 倒的速度要快，倒完后锥形瓶立即塞上棉塞，培养皿立即盖上盖子； 倒的量不能太多，否则影响培养基的冷却；也不能太少，否则影响细菌和真菌的生长；以能均匀的铺在培养皿底面为准。待培养基冷却后，到预先选择好的地点或物体上采集细菌和真菌。 因时间关系，培养基由工作人员事先已配好并制作成平板，每个学员使用一套，仅需使用前做好标记。 各组学员按照分工的操作进行平板接种。注意：除第六组外，其他组采样时请勿事先打开平板盖，采好样后待接种时再