盐酸四环素-Zn(Ⅱ)配合物和DNA的相互作用及其分析应用.pdfVIP

盐酸四环素一Zn(1I)配合物与 r}{．●- 一研论一 一究文一 -．{{}．| DNA的相互作用及分析应用 文志刚，李舒婷，赵书林 (广西师范大学化学化工学院，桂林541004) 合物的荧光增强作用，建立了一种测定DNA的新方法。在实验条件下，DNA的浓度在1．0×10川～5．0× 结果满意。 中图分类号：Q657 文献标识码：A 引言 核酸的定量测定是人们关注和研究的重要课题，它的测定对于研究核酸的生物化学反 应，发展核酸医药制品以及对疾病的诊断和防治均有重要的意义[1,2]。另外，DNA作为药 物作用的“靶标”之一，研究药物分子与DNA的相互作用是近年来人们的兴趣的研究课 题[3|。这些研究有助于了解药物在生物体内复杂的相互作用过程，为提高药物的药效和设 计新药提供理论指导。 ‘ 四环族抗生素属于快效抑菌剂，为广谱类抗菌药物，对金葡菌、链球菌、肺炎球菌、肠 球菌、淋球菌、流感杆菌等革兰菌敏感外，对立克次体、支原体属、衣原体属、分支杆菌等 也有较好的抑菌作用。可用于治疗斑疹伤寒、原发性异型肺炎和泌尿道感染等疾病[4~6]。 在盐酸四环素分子(TC)结构中(见图1)，由于存在电子给予体，能和一些金属离子形成 1：1配合物，这对盐酸四环素的组织渗透和扩散起到积极 的诱导作用。锌是人体内存在的生命元素之一，锌离子是 HCl体内许多重要反应酶活性中心的组成部分。Zn(II)又是一 种有效的Lewis酸，在多种模型体系中具有配位活性。但 目前未见四环族抗生素药物与DNA在Zn2+的中介作用下， ，，， Fig．1rh8 of 8‘。u。‘ure DNA的相互作用对探索盐酸四环素在生物体内的作用过程，甚至对四环族抗生素药物药效 ’ 的研究具有重要意义。 本研究发现Zn2+能增强盐酸四环素的荧光强度，并与之形成二元配合物，这种二元配 DNA的新方法，并已应用于人血清中DNA含量的测定。 l 实验部分 1．1仪器与试剂 LS-55荧光分光光度计(Perkin 联系人t赵书林．第一作者：文志剐．基金项目：广西教育厅科学基金资助(No．桂教科研[zooa]一22号) Yanlin． aathor：Zhao Corresponding 524 1’ (北京普析通用仪器有限公司)；PHsJ一4A型pH计(上海精密科学仪器有限公司)。 DNA储备液：称取一定量的小牛胸腺DNA(华美生物工程公司产品)，加入少量1 mol／LNaCI溶液溶解，然后以亚沸蒸馏水定容，使用前经紫外吸收光谱在260nm处的摩 尔吸光系数6600 定其纯度。盐酸四环素(TC，中国药品生物制品检定所产品)储备液：准确称取一定量 的TC，以亚沸蒸馏水溶解并定容至刻度。以亚沸蒸馏水稀释得工作溶液，工作溶液和储 中，溶于少量稀盐酸并蒸至近干。用亚沸蒸馏水稀释后转移至250ml容量瓶中，再用水 定容并摇匀。缓冲溶液均为10retool／L 沸蒸馏水。 1．2实验方法 Zn2+标准溶液和1．0ml 于10ml容量瓶中，依次加入100pLTC标准溶液，0．4ml pH 6．3的Tris—HCl