选修1专题35植物的组织培养技术dna.ppt

【典例3】(2011 年南京一模)下列关于 DNA 和血红蛋白的 提取与分离实验的叙述中，错误的是( ) A．可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪红细胞中提取到 DNA 和蛋白质 B．用不同浓度的 NaCl 溶液反复溶解与析出 DNA 可去部 分杂质 C．透析法分离蛋白质的依据是利用蛋白质不能通过半透膜 的特性 D．进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法、 电泳法等 专题3、5 植物的组织培养技术、DNA 和蛋白质技术 本专题内容与必修内容关联度 大，多分拆于必修的相关内容 中，多以选择题形式出现 实验：(1)植物的组织培养 (2)蛋白质的提取和分离 (3)PCR 技术的基本操作和应用 (4)DNA 的粗提取与鉴定 2013 年高考风向标 考纲内容 一、植物的组织培养技术 1.菊花的组织培养 全能性 (1)理论基础：植物细胞的①_______。 (2)基本过程 外植体 愈伤组织 长出丛芽→生根→移栽 (3)实验操作步骤 接种 移栽 制备 MS 培养基→外植体消毒→②_____→培养→③____ →栽培 2.月季的花药培养 (1)理论基础：花粉具有④______。 全能性 (2)花粉发育过程：⑤__________、⑥_______、⑦______ 等阶段。 四分体时期 单核期 双核期 (3)产生花粉植株的两种途径 植物组织培养所用的培养基为固体培养基。( ) √ 二、DNA 和蛋白质技术 1.DNA 的粗提取与鉴定 (1)实验原理 不同 0.14 mol/L 不 蓝色 1)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度⑧_____，浓度 为⑨___________时其溶解度最小。 2)DNA⑩___溶于酒精溶液。 3)DNA 与二苯胺在沸水浴中呈?_____。 杂质 (2)实验步骤：选材、制备鸡血细胞液→破碎细胞，获取含 DNA 的滤液→去除滤液中的?_____→DNA 析出与鉴定。 2.血红蛋白的提取和分离 相对分子质量 (1)凝胶色谱法：也称分配色谱法，是根据?_____________ _____分离蛋白质的方法。相对分子质量较小的移动速度较慢， 而相对分子质量较大的无法?_____________，移动速度较快。 (2)缓冲溶液：能够抵制外界的?_______对溶液 pH 的影响， 维持 pH?___________。 (3)电泳：带电粒子在?_____的作用下发生迁移的过程。 进入凝胶内部 酸和碱 基本不变 电场 的大小 (4)实验操作 1)样品处理及粗分离 红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透 析 2)凝胶色谱柱操作 凝胶色谱柱的装填 凝胶色谱柱的制作→?__________________→样品的加入 和洗脱 3)纯度鉴定：用 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。 3.多聚酶链式反应扩增 DNA 片段 (1)PCR 原理 DNA 模板 四种脱氧核苷酸 在一定的缓冲溶液中提供?___________、分别与两条模板 链结合的两种引物、?______________、 _________________， 同时控制温度使 DNA 复制在 _____反复进行。 (2)PCR 的反应过程：变性→ _____→延伸。 耐热的DNA聚合酶 体外 复性 PCR 扩增包括三个环节，变性、复性(退火)、延伸，这 三步的温度依次是( ) A A．95℃、55℃、72℃ C．55℃、95℃、72℃ B．72℃、55℃、95℃ D．80℃、60℃、72℃ 解析：PCR 扩增的原理就是利用DNA 耐高温的特性，使 DNA 在95 ℃左右双链解螺旋，然后在低温(37～55 ℃)情况下， 两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA 模板结合，形 成部分双链；在Taq 酶的最适温度(72 ℃)下，以引物3′端为 合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5′～3′方向延伸， 合成 DNA 新链。 考点 植物的组织培养 1.影响植物组织培养的因素 (1)内部因素：材料的选取。 (2)外部因素：营养成分的种类及配比；植物激素的用量及 使用顺序；pH、温度、光照等。 2.获得成功的关键 (1)植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差，对 培养条件要求较高。 (2)培养材料一旦被微生物污染，就会导致实验失败。原因 是微生物增殖快，生长迅速，消耗养分多，并产生代谢废物毒 害培养材料。 (3)无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以 及操作者的消毒或灭菌。 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂又分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 有利于细胞分裂，但细