营养注入后油藏微生物群落16S+rRNA基因的T-RFLP对比分析.pdfVIP

维普资讯 石 油 勘 探 与 开 发 356 2006年 6月 PETR0LEUM EXPL0RAT10N AND DEVEL0PMENT Vo1．33 NO．3 文章编号 ：1000—0747(2006)03—0356—04 营养注入后油藏微生物群落 16SrRNA基因的 T-RFLP对 比分析 程海鹰 ，肖生科 ，马光东。，汪卫东 ，王修林 (1．中国海洋大学化学化工学院；2．中国石化胜利油田采油工艺研 究院 ；3．中国石油青海油田公 司边远油田开发公司) 基金项 目：“十五 ”国家科技攻关项 目“中国大中型油田勘探开发关键技术研 究”(2003BA613A-08) 摘要 ：为 了监测油藏微生物群落动态 ，应用不依赖微生物培养与克 隆的T—RFLP方法研 究 了模拟油藏环境 中营养物的注 入对油藏微生物群落结构 的影响。以基 因组总DNA 为模板，用细菌和古茵的荧光标记 引物对 16SrRNA基 因进行 PCR 扩增 ，扩增产物经 限制性 内切酶RsaI和 MspI消化，用毛细管凝胶 电泳分离酶切产物后利用 LIFD检测器精确检测 rr_ RFs，以确定每个片断的长度和丰度 。不 同时期微生物群落的T—RFLP对比分析表明，营养物注入后 ，T—RF的数量与丰度 都有显著提高 ，且不同时期呈现 出不 同的群落结构。在 内源微生物驱油研究 中，T—RFLP方法是跟踪油藏微生物群落动态 和对 比分析群 落结构 的有效方法 。图2表 2参 14 关键词 ：油藏 ；微生物群落 ；16SrRNA；分子技 术 ；聚合酶链反应 ；T-RFLP；毛 细管凝胶 电泳 中图分类号 ：TE357．9 文献标识码 ：A 16SrRNA genescomparativeanalysisofmicrobialcommunityin nutrient- injectedoilreservoirbytheT—RFLPmethod CHENG Hai—ying ，XIAO Sheng—ke ，M A Guang—dong。，W ANG W ei—dong ，W ANG Xiu—lin (1．CollegeofChemistryandChemicalEngineering，OceanUniversityofChina，Shandong266003，China； 2．OilProduction TechnologyResearch Institute，SLOF，Shandong257000，China；3．Bianyuan DevelopmentCorp．，PetroChinaQinghaiOilfieldCompany，Gansu736202。China) Abstract：Formonitoring thedynamicsofmicrobialcommunity undersimulated oilreservoirconditions。theeffectofnutrient injectiononthestructureofoilreservoirmicrobialocmmunitywasinvestigatedbyapplyingacultivationandcloneindependent moleculartechniques-terminalrestrictionfragmentlengthpolymorphism (T-RFLP)．W iththebacterialandarchaealprimerpairsin whichforwardprimerswerefluorescentlylabelde ，16SrRNA geneswereamplifide from totalcommunit