伪狂犬病病毒、猪细小病毒和流行性乙型脑炎病毒检测基因芯片的制备.pdfVIP

Vd．27No．5 6钮 中国兽医学报加07年9月第27卷第5期踟I．，仫融Sept．2007 伪狂犬病病毒、猪细小病毒和流行性乙型脑炎病毒检测基因芯片的制备 张焕容1一，曹三杰1I，文心田1，肖驰1 (1．四川农业大学动物科技学院，动物传染病与基因芯片实验室。 四川雅安625014；2．西南民族大学生命科学与技术学院，四川成都610041) 摘要：对伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPv)和流行性乙型脑炎病毒(JEv)检测基因芯片的制备及该芯片的检 测技术进行了研究。选定靶基因最佳点样质量浓度为2∞蝉少，L，用基因芯片点样仪将其点制在氨基化基片上，经 增制备探针，对芯片的质量进行了评价。结果表明，制备的芯片质量好，探针最佳使用质量浓度为3咖坞／L，芯片 系统检测灵敏度可迭3坞／L。该芯片可同时检测PRV、PPv争JEV，其灵敏度高、特异性强，芯片可重复使用，室温 下至少可保存4个月。 关键词：猪伪狂犬病病毒；猪细小病毒；流行性乙型脑炎病毒；基因芯片；制备 中图分类号：鼹52．65；Q粥 文献标识码：A 文章编号2007)∞由柳埘 Prepa晌腿V，PI．v锄d肛VdeteIm蛐“凹唿nay 压nNG cllil H啪一彻lgl”，CAo S8n．jieH，wEN)【in．妇1，xIAo(1．￡咖咖矿14砌，试匈‰眈钾瓣 蒯施泐删，伤％B矿加拥脚切聊蒯恸硎她，y胍触，＆加Ag磁删踟脚，拖帆， 也610041，‰) hve Abst瞰：PRv，PPvaIld心dete洳渤岫y beelI脚日lediIl曲埘．1he血唧lla8‰鼬catedb 印她蛔I孵卵I翳蛳mdm曲ed龇讲tlltl∞k碰c0似捌帕捌肌2【)DIng／L 妇咖触《tlle p如懈3000∥L，蛐tIIc蝴0f妇嘲龇c妇咖of3舭．‰础 l删4砌th8． 唧咖be删细越l础lO岫and删细m 1畸腻：p0晒鹏pB即dombies洒；p0积mp日rv咖s，JapdI龇即∞pIIaliti8v洫璩；mi衄姗y；捌证∞6m 伪狂犬病病毒(Porc硫p8I即dombi瞄、，in舾，PRv)、因芯片检测法，该方法能同步对腿v、PPv和JE、r进 行检测和鉴别诊断。 猪细小病毒(Porc沁删玎玛，PPv)和流行性乙型 脑炎病毒(抽Ⅺ11e∞印cephalitis诅m，JEV)是引起猪 繁殖障碍的3种主要病原体[1I，在临床上表现出相1 材料与方法 似的症状，且常常混合或继发感染，常规的检测方法 1．1芯片靶基因重组质粒PRVgB、P州gG、PRV 难以同时确诊这几种疾病。基因芯片技术具有高通 TK、PP、rB1Nsl、PPvB1 sR-l 班、PRv vP2、PPv 量、并行性和微型化的特点，现已广泛应用于遗传性 NSl、既ⅣSR-lNS2、nvSR-lNS3、PPVSR-1vPl、 疾病、肿瘤的诊断【2】，对人和动物感染性疾病的诊断 HⅣSR．1VP2、皿V C、皿VP蝴／M、Ⅱ=vE、ⅡⅣNSl 已有大量文献报道【J。本研究制备了PRV、PPv和 和JEv 删3种病