HPLC法测定蛇胆陈皮胶囊中橙皮苷的含量.pdfVIP

江西中医药2008年 12月第 12期总39卷第312期 橙皮苷的含量 331200) 密称定，置 100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释 刻度，摇匀，精密量取 2ml，置 10ml量瓶中，加 ％甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得。 5 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品， 一 匀，取约0．5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 - 人 甲醇5Oml，称定重量，超声处理40分钟，取出， 冷，再称重，用 甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过， ； 精密量取续滤液25ml，蒸至约5ml，通过已处理 D101大孔吸附树脂 (内径 1．5em，长20cm)，先 水 100ml洗脱，弃去水液，再用乙醇 100ml洗脱， ■ 提供。 解，并定量转移至25ml的量瓶中，加50％甲醇溶液 2 方法和结果 至刻度 ，摇匀，滤过，即得 。 2．1 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充 又试验过程中，对比了乙醇洗脱量对样品含量 剂，甲醇-0．1％磷酸溶液 (40：60)为流动相，流速 测定结果的影响，结果表明，洗脱用乙醇的量为 100 0．7ml／min，检测波长为 283nm，柱温 35℃。照此 ml时，样品中的橙皮苷便可充分提出，故确定乙醇 条件分析，橙皮苷对照品和制剂中的其它组分均能 的用量为 100ml。 达到基线分离，且分离度均大于 1．5，理论板数按橙 2．6 空白试验 按处方取不含陈皮的其它药味，依 皮苷峰计算均大于3000。 制法制成阴性样品，再依供试品溶液制备方法制成 2．2 波长选择 取橙皮苷对照品的50％ 甲醇溶 阴性样品溶液，按正文方法测定，结果阴性样品溶液 液，置 uV一8500紫外仪中扫描，结果橙皮苷在283 不含橙皮苷，表明阴性对照对本法无干扰。 nm处有一吸收峰，结合 《中国药典))2005年版一部 2．7 线性关系的考察 精密称取在橙皮苷对照品 陈皮药材 [含量测定]项下的检测波长也为283nm， 14．8mg，置 100ml量瓶 中，加 甲醇使溶解，并稀释 故选择283nm为检测波长。 至刻度，摇匀 (148 g／m1)，再分别精密吸取适量， 2．3 流动相的选择 根据 《中国药典))2005年版一 用50％甲醇溶液稀释成不 同浓度的对照品溶液： 部陈皮药材[含量测定]项下的流动相体系为甲醇． 14．8、29．6、44．4、59．2、74 g／ml。分别精密吸取上 醋酸一水，结合实验，以甲醇．醋酸．水 (35：4：61)为流 述不同浓度的对照品溶液各20 l，按正文中色谱条 动相体系，橙皮苷峰形不是很理想，在流动相中适量 件分析，测定峰面积。 加磷酸后(将醋酸一水换为0．1％磷酸溶液)，橙皮苷 以峰面积积分值为纵坐标，橙皮苷的量为横坐 与其它组分分离完全，峰形有所改善，结果满意。 标绘制标准曲线，计算得回归方程：Y=5010803X 2．4 对照品溶液的制备 取橙皮苷对照品 15mg，