苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究.pdfVIP

江西中医药2009年6月第6期总40卷第318期 苦参碱对人鼻咽癌 CNE2细胞增殖的抑制作用研究 - k 张力 李海英 吴式跨 吴建波 韩义香 (温州医学院附属第一医院 温州325000) 摘要：目的：观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响。方法：采用倒置显微镜观察苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞形态的影 响；采用CCK一8法检测苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞生长的影响。结果：苦参碱处理后 CNE2细胞形态发生改变，细胞皱缩，变 小变圆，空泡明显。苦参碱能抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖。在实验浓度范围内，随着剂量的增加，抑制作用更加明显；同一 剂量下，72h内药物作用时间越长，抑制作用越明显。结论 ：苦参碱能够抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖。 关键词 ：苦参碱 ；鼻咽癌细胞；增殖 中图分类号：R285．5 文献标识码：A 苦参碱(MT)是中药苦参的主要有效成分，属于 药组和对照组细胞的形态变化。 四环的喹诺里西啶类 (quinolizidine)，分子式为 C 2．3 CCK8法检测苦参碱对CNE2细胞增殖的影响 HMN ，具有抗病原体、抗炎症、抗肿瘤、抗心律失常 量效关系：96孔培养板每孔接种8×10’个 CNE2 等生物活性 】。但最近的研究热点集中在对肿瘤 细胞 ，24h后分别加入不同浓度苦参碱使其终浓度 的防治作用及苦参生物碱类抗肿瘤机制的研究，而 分别为0、0．25、0．5、l、1．5、2和2．5mg／ml，每组6 针对这些作用机制的研究可望开发出新型的与苦参 复孔，继续培养48h，每孔加入 CCK．8溶液2O l， 碱抗肿瘤作用同一分子靶点的药物，这将会为治疗 37℃继续孵育2h，轻轻振荡混匀，酶标仪450nm 肿瘤开辟一条新的途径。 波长测 OD值。并按下列公式计算细胞增殖抑制 鼻咽癌是我国南方最常见的头颈部恶性肿瘤之 率：细胞增殖抑制率 (％)=(对照组 OD值 用药组 一 ， 病理类型以低分化鳞状细胞癌多见，I临床治疗以 OD值)／对照组OD值 ×100％，绘制抑制率曲线图。 放疗为主，晚期患者辅以化疗。与传统的化疗药物 时效关系：在 96孔培养板中接种 8x10个 相比，天然抗肿瘤药物 日益受到人们的关注 ]。本 CNE2细胞，24h后取其中一个 96孔板每孔加入 实验通过观察苦参碱对鼻咽癌 CNE2细胞增殖的影 CCK-820 l，37oC继续孵育2h，振荡混匀，酶标仪 响作用，研究其抗鼻咽癌的可能机制，旨在为其更广 450nm波长测OD值。另4个96孔培养板分别加 泛的作用于临床提供有力的实验依据。 入0．25、0．5、1、1．5,2和2．5m m】苦参碱，每组6 1 材料 复孔，继续培养 12、24、48、72h后，每孔加入 CCK一8 1．1 细胞和试剂 人鼻咽癌细胞株 CNE2购 自湖 溶液2O ，37℃继续孵育2h，振荡混匀，酶标仪 南湘雅细胞中心，苦参碱购 自西安市天园生物制剂 450nm波长测OD值。按上述方法测值，计算抑制 厂，细胞培养基 RPMI一1640购 自GIBCO公司，胎牛 率，绘制抑制率曲线。 血清购 自杭州四季青公司，CCK一8购 自日本同仁化 2．4 统计学处理方法 不同药物浓度组间的比较 学研究所 。 采用one—wayANOVA分析，各药物浓度组与对照组 1．2 主要仪器设备 倒置相差显微镜，德国Leica； 的比较采用Dunnett检验，以0【=0．05为检验水准， 酶标仪EEx800，美国。 采用 spss13．0数据分析系统。 2 方法 3 结果 2．1 细