抗HBcAg人源性单链抗体细胞内表达和其抗病毒复制的实验研究.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 18 3 Vol.18 No.3 年 月 2 0 0 2 9 C INESEJOURNALOFVIROLOGY Se t.p 2 0 0 2 抗HBCAg 人源性单链抗体细胞内表达及其抗病毒复制的实验研究 朱明华，顾广玉，段凌浔，李芳梅，肖农，戴益民 （第二军医大学 长海医院病理科，上海， ） 200433 摘要：应用人源性抗 BcAg单链抗体细胞内表达技术，探讨抗 BV复制基因治疗的应用价值。应用噬菌体展示 和基因重组技术，从 BV感染的外周血淋巴细胞克隆了人源性抗 BcAg单链抗体，并重组至逆转录病毒载体。 以人肝癌细胞 和 ／ ／为靶细胞进行基因共转染，分别测定实验组细胞上清中的 和 smmc-7721 PLC PRF 5 BsAg BeAg，与对照组做比较，观察抗 BcAg单链抗体细胞内表达的抗病毒治疗作用。结果显示，在急性 BV感染的 细胞株中，抑制病毒复制效率为49%!61%，在慢性病毒感染细胞，抑制率为41%!54%。实验结果表明，应用单 链抗体细胞内表达技术，在抗病毒治疗研究中具有潜在的应用价值。应对 的 个开放阅读框架编码产物进 BV 4 行全面的对比研究，以发现抑制效率高、实用价值大的靶基因。 关键词：单链抗体；人源性；乙型肝炎病毒；核心抗原；细胞内免疫；基因治疗 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） R373.21 R978 A 1000-8721 2002 03-0205-06 乙型肝炎（乙肝）病毒（ ， ） 养于含 小牛血清的 培养液（ ）， 、 。 he atitisB virus BVp 10% DMEM GIBCO 37C 5%CO2 感染者和携带者在世界上有 亿以上人群，而我国 2 HBCAg 表达载体构建及抗原纯化 全长 BcAg基因片段经 3 扩 增 获 取，引物 序 列 为 ： PCR P1 5 - CTAAGATTGA- 则占三分之一以上。 BV 慢性感染是原发性肝癌 ， ： GATCTTCTGCGACGCGG - 3 P2 5 - ATGGACATCGACC- （rimar he atocellular carcinoma， ）主要的致病 p y p P C ，以 （ ）质粒为模板，扩