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第 卷 第 期 病 毒 学 报
18 1 VoI . 18 No . 1
年 月
2 0 0 2 3 CHI NESE JOURNAL OF VIROLOGY March 2 0 0 2
互补引物 模板评价毕加酵母表达的丙型肝炎病毒
/
RNA 依赖的RNA 聚合酶
1 1 2 2 1 1
魏来 ，陈红松 ，陈勇 ，封波 ，丛旭 ，王宇
（ 北京大学人民医院，北京大学肝病研究所，北京 ； 徐州医学院附属医院，徐州）
1. 100044 2 .
摘要：构建含有感染性克隆 非结构基因 区序列的酵母表达质粒，转化毕加酵母，获得持续、可溶性
HCV 5b HCV
依赖的 聚合酶（ ）的表达，纯化蛋白在 及 中显示出特异性的
RNA RNA RCRp SDS - PAGE Western bIot 64 . 2kD HCV
蛋白带，同聚引物 模板测定显示 的活性极低，延长反应时间， 聚合活性仅轻度升高。采用合成的
RCRp / RCRp RNA
杂聚互补引物 模板，未发现核苷酸在毕加酵母表达的 作用下掺入模板，随时间延长，杂聚互补引物 模板降
/ RCRp /
解。
关键词：丙型肝炎病毒； 依赖的 聚合酶；互补引物 模板
RNA RNA /
中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ）
R373 . 2 1 O786 A 1000 - 872 1 2002 0 1 - 0029 - 05
丙型肝炎病毒（ ）感染后自发性病毒清除 非来自真核细胞或大肠杆菌系统，均获得显著的研
HCV
［］ ［］
1 6
率较低，导致80 % 的急性感染者慢性化 。目前最 究成绩 。我们也正在进行具有野生起点的HCV
［］
有效的治疗是干扰素，但仅有 的干扰素治疗者 9
25 % RCR 表达 。本研究则尝试以毕加酵母 （
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