杠板归中齐墩果酸提取工艺研究方案.docVIP

一、目的 为筛选杠板归中齐墩果酸的最佳提取工艺，采用L9(34）（3水平4因素）正交设计考察药材粒度、乙醇用量、提取时间和提取次数4个因素，用高效液相色谱法（HPLC）测定杠板归中齐墩果酸的含量。 二、仪器与试药 电子分析天平、超声清洗机、水浴锅、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、目筛（50、80、100各一个） 试药：齐墩果酸对照品，石油醚、乙醇、正丁醇（均为分析纯）， 甲醇为色谱纯, 水为高纯水, 其他试剂均为分析纯。 三、实验方法 （一）提取方法的确定 1.超声提取 精密称取杠板归中药材粗粉10g，置300mL圆底烧瓶中，加石油醚150mL浸泡2次，每次2h，过滤，残渣挥尽石油醚后加95%乙醇150mL，置超声提取器中提取1h，滤过，残渣加入95%乙醇150mL继续超声提取1h，滤过，合并2次提取液，减压回收乙醇，残渣加蒸馏水50mL溶解，溶液用水饱和正丁醇萃取3次，每次50mL，弃去水层，合并正丁醇层，将正丁醇溶液60℃减压蒸干得齐墩果酸产物。 2.回流提取 精密称取杠板归中药材粗粉10g，置300mL圆底烧瓶中，加石油醚150mL浸泡2次，每次2h，过滤，残渣挥尽石油醚后加95%乙醇150mL，在60℃水浴中回流提取2次，合并2次提取液，减压回收95%乙醇，残渣加蒸馏水50mL溶解，溶液用水饱和正丁醇萃取3次，每次50mL，弃去水层，合并正丁醇层，将正丁醇溶液60℃减压干燥得齐墩果酸产物。 确定方法 用高效液相色谱法（HPLC）测定杠板归中齐墩果酸的含量，对比超声提取、回流提取的效果，选择齐墩果酸含量高的提取方法**。 （二）试验因素和因素水平的确定 1.杠板归**方法提取液因素水平表 因素 水平 A药材粒度（目） B乙醇用量（倍） C提取时间（h） D提取次数（次） 1 50 10 1 1 2 80 15 2 2 3 100 20 3 3 正交试验方案 试验号 A B C D 齐墩果酸含量（%） 总浸出物得率（%） 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 2 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 齐墩 Ⅰ 果酸 Ⅱ 含量 Ⅲ R 总浸 Ⅰ 出物 Ⅱ 得率 Ⅲ R 3.正交试验方差分析 　 　　　　　方差来源 离均差平方和 自由度 方差 　　　F　　　P 齐墩果　 A 酸含量 B　　　 C　　　　　　 　 D　　　　　 总浸出 A 物得率 B C D