第九章 氨基酸与核酸发酵.docVIP

第九章 氨基酸与核酸发酵 第一节 味精 一、概述 味精俗称麸酸钠、谷氨酸钠（分子式C5H8NO4Na） （一）生产历史 早期—从天然的食物材料中取得 中期—最早商业化制造味精的原料是面筋 近期—糖是生产味精的主要原料 （二）氨基酸的制备方法 发酵法：直接发酵法、添加前体的发酵法 提取法：胱氨酸、半胱氨酸和酪氨酸 酶法：利用微生物细胞或微生物产生的酶 合成法：DL-蛋氨酸、DL-丙氨酸、甘氨酸、和苯丙氨酸。 （三）味精的生产 图1：味精的产量走势 二、谷氨酸的生物合成机理 1. 谷氨酸 （?-氨基戊二酸） O C-OH 第一代鲜味剂 H2N- C- H L-谷氨酸单钠盐——味精 H-C-H H-C-H H-C O OH L-型 2.谷氨酸的生物合成 α-KGA + NH4+ +NADPH == GA + NADP α-KGA NADPH α-KGA L-谷氨酸脱氢酶 异柠檬酸脱羧氧化 GA NADP 异柠檬酸 （1）EMP:丙酮酸，ATP,NADH2 （2）HMP:6－磷酸果糖 3－磷酸甘油酸 NADPH2:?－酮戊二酸还原氨基化必需的供氢体。 （3）TCA循环:生成谷氨酸前体物质?－酮戊二酸。 （4）CO2固定反应:补充草酰乙酸。 （5）乙醛酸循环:使琥珀酸、延胡索酸和苹果酸的量得 （DCA循环） 到补充，维持TCA循环的正常运转。 谷氨酸脱氢酶 （6）还原氨基化反应:?－酮戊二酸 谷氨酸 丙酮酸 GA的生物合成途径 （1）在磷酸丙酮酸羧化酶的作用下 磷酸丙酮酸 + CO2 + GTP == 草酰乙酸 + GDP （2）在苹果酸酶的作用下 丙酮酸 + CO2 +NADH === 苹果酸 + NAD CO2固定反应 需要Mn+做催化剂，所以，在GA发酵过程中需要向培养基中补充Mn+。 封闭乙醛酸循环，不存在CO2固定反应： 3/2 C6H12O6 + NH4+ → C5H9NO4 + 4 CO2 产率：147 /（180*3/2） == 54.4% 封闭乙醛酸循环，存在CO2固定反应： C6H12O6 + NH4+ → C5H9NO4 + CO2 产率：147 / 180 == 81.7% 影响GA发酵糖转化率的其它因素： （1）GA发酵前期菌体增殖消耗葡萄糖（20%糖） （2）DCA 循环不可能完全封闭； （3）α-KGA不可能完全转化为GA； （4）生成的GA不可能完全分泌到细胞外； （5）残糖含0.5%-0.7%之间。 3.谷氨酸生产菌的生化特征 （1）生物素缺陷型。 （2）?－酮戊二酸脱氢酶活性弱，异柠檬酸脱氢 酶活性强，异柠檬酸裂解酶活性弱。 （3）谷氨酸脱氢酶活性高，经呼吸链氧化NADPH2 的能力弱。 （4）菌体本身利用谷氨酸的能力低。 （5）有苹果酸酶和丙酮酸羧化酶。 下列关于谷氨酸产生菌的描述，哪些是正确的？ A：?-酮戊二酸氧化能力微弱， B：谷氨酸脱氢酶活性强， C：具有向胞外分泌谷氨酸的能力， D：在菌体生长期乙醛酸循环弱， E：在产酸期乙醛酸循环弱， F：CO2固定能力弱。 下列关于谷氨酸产生菌的描述，哪些是正确的？ A：?-酮戊二酸氧化能力微弱， √ B：谷氨酸脱氢酶活性强， √ C：具有向胞外分泌谷氨酸的能力， √ D：在菌体生长期乙醛酸循环弱， E：在产酸期乙醛酸循环弱， √ F：CO2固定能力弱。 4.谷氨酸产生菌（全是细菌） 棒杆菌属 北京棒杆菌 C. pekinense Corynebacterium 钝齿棒杆菌 C. crenatum 谷氨酸棒杆菌 C. glutamicum 短杆菌属 黄色短杆菌 B. flvum Brevibacterium