HPLC测定车前草提取物中熊果酸_齐墩果酸的含量.pdfVIP

第 18 卷 　第 3 期 河 　南 　科 　学 Vol 18 　No. 3 　　　　　　　　　　　　 2000 年 9 月 HENAN 　SCIENCE 　　　　　　　　　　　　 Sept 2000 文章编号 (2000) HPL C 测定车前草提取物中 熊果酸、齐墩果酸的含量 1 2 2 殷明文 , 　袁 珂 , 　张淑玲 ( 1. 河南医科大学基础医学院 ,河南 郑州 　450052 ;2. 河南中医学院中药系 ,河南 郑州 　450008) 摘　要 :用高效液相色谱法对车前草提取物中的熊果酸、齐墩果酸进行了含量测定。本法准确、灵敏 ,可用于车前 草及其制剂的质量控制。 关键词 :高效液相色谱法 ;车前草 ;熊果酸 ;齐墩果酸 ;含量测定 中图分类号:Q949. 777. 6 　　　文献标识码 :A ( ) ( ) 车前草为车前科植物车前 Plantago asiatica L . 或平车前 Plantago depressa Willd. 的干燥全草。具 有利水通淋、清热明目、护肝降压、抑菌和降低血清胆固醇等方面的作用。熊果酸、齐墩果酸为车前草中的主 要有效成分。近年药理研究表明[1 - 3 ] ,熊果酸和齐墩果酸均具有一定的抗肿瘤及促免疫活性。本文报道采 用高效液相色谱法测定车前草提取物中熊果酸、齐墩果酸的含量。 1 　仪器 、样品及试剂 ( ) 　　LC - 5A 型高效液相色谱仪 日本岛津公司 ,SPD - 5A 型紫外 - 可见检测器 ,C - R3 Ae plus 型数据处 理机。 熊果酸、齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供。 车前草于 1998 年 8 月采自河南省郑州市郊 ,色谱用甲醇为色谱纯试剂 ,水为双蒸水。 2 　实验方法与结果 2 . 1 　色谱条件 ( ) ( ) λ 色谱柱为 C18 - ODS 柱 日本岛津 , 流动相为甲醇 - 水 88 : 12 , 检测波长 = 220nm , 灵敏度 : 0. 005AU FS ,流速 :0. 6ml/ min ,柱温 :25 ℃,外标法定量分析程序由 C - R3 Ae plus 积分仪提供。 2 . 2 　对照品溶液的配制 精密称取干燥恒重的熊果酸对照品 2 . 02mg 、齐墩果酸对照品2. 05mg ,置 10ml 容量瓶中 ,加甲醇溶解并 稀释至刻度 ,制成对照品混合溶液 ,分别为 0. 202mg/ ml 和 0. 205mg/ ml 。 2 . 3 　样品溶液的制备 车前全草去泥土 ,阴干后经 50 ℃鼓风干燥 3h ,粉碎研细并过 60 目筛。精密称取100g ,置破碎提取器容 [4 ] 器中 ,加入 10 倍量 95 %乙醇破碎提取 3min ,抽滤 ,除去药渣后将滤液在 60 ℃条件下真空薄膜浓缩至一定 浓度。将浓缩液转移至烧瓶中 ,置旋转薄膜蒸发仪中于 60 ℃真空抽成干燥粉末 ,用钢铲刮出 ,置小瓶中 ,将 小瓶至真空干燥器中干燥恒重。取车前草提取物干粉 1g , 加乙醚 200ml 置索氏提取器中提取至近无色 (3h) ,将乙醚提取液浓缩至干 ,残留物用甲醇溶解 ,转移至 50ml 容量瓶中加甲醇溶解定容至刻度 ,成为车前 草提取物样品溶液。 2 . 4 　线性化范围试验 μ