家兔的氨茶碱静脉注射药代动力学研究.pdfVIP

家兔的氨茶碱静脉注射药代动力学研究 实验目的 1、 掌握紫外分光光度法测定兔血中氨茶碱 2、 掌握药动学参数的计算方法 【实验原理】 氨茶碱，多用于治疗支气管哮喘，为茶碱与乙二胺的复 盐。茶碱是主要的药效成分，而乙二胺则能够提高药物的水 溶性。由于其治疗窗相对较窄（10-20 微克/毫升），大约有 75%的患者在血药浓度超过25微克/毫升的时候出现中毒反 应。因此，加强患者的氨茶碱的血药浓度监控非常必要。 茶碱是一种弱酸，所以可以用有机溶剂在酸性条件下将 其从血清里面中提取分离，同时血清蛋白变成沉淀。随后， 茶碱可以用碱液从有机溶剂中提取分离。茶碱的最大吸收波 长是 274nm，然而，空白血清在该波长处也有显著的吸收， 所以使用双波长（274nm 和 298nm）紫外分光光度法来测 定兔血中的茶碱浓度。 【实验步骤】 1、 参比溶液的标准曲线 取 茶 碱 5.0g 至 10 容 量 瓶 中 ， 用 10ml NaOH 溶 液 （0.1mol/L）溶解并定容至刻度制成 500ug/ml 的储备液。 分别取5.0,10.0,15.0,20.0,25.0和30.0ul的储备液加至装有 500ul 空白血清样品的试管中。最终的生物标准校正浓度范 围为 5.0-30.0ug/ml。标准样品通过下述的方法进行测定。 绘制以△A（A -A ）为纵坐标，以浓度为横坐标的标准曲 274 298 线。 2、 血清中茶碱浓度的测定 取 200ul 的盐酸（0.1mol/L）和 5ml 的氯仿-异丙醇（95:5） 加入 500ul 的 血清样品中。混合均匀后，将混合液用离心 机（3000r/min）离心 10min。然后，取氯仿层（3.0ml） 转移进入另一试管中，再加入 3.0ml 的氢氧化钠（0.1mol/L） 混匀。混合液用离心机（3000r/min）离心 10min。取上清 液（约 2.5ml）分别在 274nm 和 298nm 处测定其吸光度 A。 空白液为 2.0ml 的蒸馏水和 4.0ml 的氢氧化钠（0.1mol/L） 混匀制成。血液中的药物浓度使用茶碱标准曲线的线性回归 方程进行计算。 3、 动物实验 1） 注射给药：氨茶碱（用两倍体积的 5%的葡萄糖溶液稀 释）以 15mg/kg 的剂量通过耳缘静脉在 2min 之内缓慢 注射入家兔体内。 2） 血液取样时间：静脉注射氨茶碱后在不同时间点取血 （10, 20，30，45, 60，90,120,150,180，和 240min）。 3） 血液取样方法：切割家兔耳缘静脉取血（2-3ml），放 置 20 分钟后，离心机（5000r/min）离心 10min。上清 液即为分析用血清样本。 【数据处理】 1、 通过计算与家兔血液中的茶碱浓度有关的△A 来绘制 标准曲线 2、 计算血清样品中茶碱浓度 3、 计算药动学参数 绘制药物的药时曲线和用梯形分块法计算 AUC。 绘制对数曲线并选择符合数据的隔室模型。 计算消除速率常数 K 和半衰期 【思考题】 1、如何判断与数据相匹配的隔室模型？ 2、血清样品和血浆样品有什么不同？ 3、AUC 的重要意义是什么？ Supplement：参数计算全用 3p97 处理，到时那个软件会 自动生成 9 份数据，分别为 1,2,3 三室的三种不同算法算出 的结果，大家只要选择以 1/c 为权重的那三份进行比较，选 择 AIC 最小即最佳隔室模型来作为你们实验的结果即可。软 件生成的曲线图截取非常麻烦，并且那个图不美观，所以蔡 老师说直接用 EXCEL 来作图即可。 个人能力有限，可能存在翻译错误，仅供参考，希望大家自 己仔细阅读英语原版！！O(∩_∩)O~ 以上是从网上下的 个人修改了一下下 不知道那个蔡老师 是不是我们的蔡老师 可能翻译的不好 大家看看 有需要 改动的地方大家自己动动手咯 O(∩_∩)O 哈哈~↖(^ω^)↗