猪流行性腹泻病毒蛋白对Vero E6核蛋白B23.1影响.pdfVIP

ChineseJournalofVeterinaryMedicine 中国兽 医杂志 2012年 (第 48卷)第 4期 21 猪流行性腹泻病毒蛋 白对 VeroE6 核蛋 白B23．1的影响 石 达 ，吕茂杰 ，陈建飞，时红艳 ，张志榜 ，冯 力 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽 医生物技术 国家重 点实验室猪传染病研究室 ，黑龙江 哈尔滨 150001) 摘要：为了解猪流行性腹泻病毒 (PEDV)核蛋 白N对 VeroE6细胞核仁蛋 白B23．1的影响，将本实验室构建的DsRed— N1／B23．1重组质粒转染 VetoE6细胞 ，转染 6h后接种 PEDV，分别在转染后 12、18h和24h三个时间点，进行病毒感染细胞 的间接免疫试验 ，同时设未感染对照组，而后利用激光共聚焦显微镜分析感染和转染细胞 中B23．1蛋 白的变化 。结果表 明， PEDVN蛋 白与 VeroE6核蛋 白B23．1有共定位特征，在 PEDV感染 VeroE6细胞 12h后 ，B231蛋 白开始发生变化 ，随着 时间的延长逐渐碎裂、分散。这个结果提示，病毒可能通过破坏核仁的结构和核仁蛋 白的功能，进而为病毒的复制提供便利。 关键词 ：猪流行性腹泻病毒 ；核衣壳蛋 白；VeroE6细胞 ；核蛋 白B23．1 中图分类号 ：$852．659．6 文献标识码 ：A 文章编号 ：0529—6005(2012)04—0021—02 EffectofPEDV N protein onB23．1protein inVeroE6cellduring infectionwith theporcineepidemicdiarrheavirus SHIDa，LV Mao—jie，CHEN Jian—fei，SHIHong—yan，ZHANGZhi—bang，FENGLi (DerpartmentofSwineInfectiousDiseases，StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology， HarbinVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China) Abstract：TounderstandtheeffectofPEDV N proteinonB23．1proteininVerocel1duringinfection withtheporcineepidemicdiarrheavirus，VeroE6cellsweretransfectedwith recombinantplasmidspD- sRed2一N1／B23．1，andthechangesofB23．1proteinwereobservedusingconfocalmicroscopyanalysisat 12，18hand24hposttransfection．ResultsshowedthatthePEDV N proteinandtheB23．1phosphoprotein hadCO—localizationfeaturesinCO—transfectedcellsandB23．1proteinstartedchangingat12hafterinfected PEDV ，evencrushwithtimeextension，butthecontrolgrouponlyhadlightchanges．Theseresultsstrong— lysuggestedthatvirusesinteractwiththenucleolustousurphost—cellfunctionsandrecruitnueleolarpro- teinstofacilitatevirusreplication． Keywords：porcineepidemicdiarrheavirus；nucleocap sidprotein；VetoE6cell；nucleolarphospho— proteinB23．1 Correspondingauthor：FENG Li 猪流行 性腹泻 (porcineepidem