绿色荧光蛋白与潮霉素抗性双标记载体转化草酸青霉菌P8的研究.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’() *! 1( *# 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ +,-,./,0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 绿色荧光蛋白和潮霉素抗性双标记载体转化草酸青霉菌 的研究 ! $ 张 磊 范丙全 黄为一 （南京农业大学生命科学院 南京 $%%7 ） $ （中国农业科学院农业资源与农业区划研究所 北京 %%%4） 摘 要：草酸青霉菌 （ ）溶磷菌株具有较强的溶解多种无机难溶磷的能力和促进作物生长的作 G4 !#$%$$’( )*+$%’( 用。为研究 在作物根际的定殖状况，用携带加强型绿色荧光蛋白和潮霉素抗性的双标记载体转化溶磷青霉菌 G4 的原生质体，筛选出稳定、高效表达 并对潮霉素产生抗性的转化菌株， 杂交分析结果显示，外源质粒 G4 H8G I(JKD,0? +1L 是以非同源重组方式整合到转化菌株基因组染色体上。试验证明转化菌株的形态学特征和溶磷能力与野生 型菌株无明显差别。 关键词：草酸溶磷青霉菌 ，转化，绿色荧光蛋白（ ），潮霉素磷酸转移酶基因（ ） G4 H8G ,-, 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） M34 L %%%6#$%7 $%% %#6%4!$6%! ［］ IN,))?E 等 首次报道用H8G 标记植物致病菌 5)/+ 在土壤中主要以孢子形态存在，在营养丰富的 ./0$+1) (+23$/ ，借助激光共聚焦显微镜原位观察研 根际能观察到萌发的菌丝和新生的孢子。国内对应 究 . * (+23$/ 的定殖、增殖及与作物的互作关系，随 用H8G 标记微生物研究其定殖也见报道，但是以 ［，］ 3 4 之 （ ）成为土壤微生物的 标记丝状真菌仍未见报道 。 H8G H0,,? 8)J(0,A-,?K G0(K,? H8G 生态学研究的一个有效工具。国内外已见大量报道 迄今，应用H8G 标记溶磷菌株以研究其在作物