共振光散射测定蛋白质的新方法.pdfVIP

第 23 卷第 4 期 分 析 科 学 学 报 2007 年 8 月 Vol . 23 　No . 4 J OU RN AL O F AN AL YTICAL SCIEN CE Aug . 2007 文章编号 :10066 144 (2007) 共振光散射测定蛋白质的新方法 王守兴 , 王 　峰 , 黄 　薇 ( 山东枣庄学院化学系 ,山东枣庄 277 160) 摘 　要 :在非离子表面活性剂 O P 存在下 ,姜黄素能与蛋白质发生作用 。研究表明 ,蛋 白质与非离子表面活性剂 O P 可协同增强姜黄素的共振光散射强度 ,其增强程度与蛋 白质的浓度在一定范围内呈良好的线性关系 。在 8 ×10 - 5 mol ·L - 1 姜黄素和 3 ∶10 000 ( ) 的非离子表面活性剂 O P 存在下 , 该法测定牛血清 白蛋 白 B SA 和人血清 白蛋 白 ( ) μ - 1 μ - 1 H SA 的线性范围分别为 0 . 00 1～10 g ·mL 和 0 . 00 1～1 g ·mL ,检出限分别为 0 . 23 n g ·mL - 1 和 0 . 89 n g ·mL - 1 。方法已用于实际样品的测定 ,其结果令人满意 。 关键词 :共振光散射 ;蛋白质 ;姜黄素 ;O P 中图分类号 :O657 . 39 　　　文献标识码 :A 蛋白质作为生命活动的物质基础 ,其定量分析在生物学 、医学及其营养科学等领域中具有重要意义 。 蛋白质含量的分析方法很多 。目前应用最广 、操作最为简便的是分子光谱分析法 ,包括吸光光度法 、荧光 分析法以及新近发展起来的共振光散射分析法[ 1 ] 。上述方法 ,共振光散射技术应用于生物大分子的分析 简便且具有很高的灵敏度 ,为生物化学和临床分析中样品的检测提供了一条新的途径 , 已成为 目前研究生 物大分子的重要手段 。蛋白质的共振光散射探针大多为有机染料和一些小分子物质[2 - 5 ] 。 ( ) 姜黄素 Curcumin 是中药姜黄的主要成分 ,是一种酚性色素 ,也是食用黄色色素 ,具有抗炎 、抗氧化 和抗肿瘤等功效 ,是有效的抗致突变剂和抗促癌剂[ 6 - 8 ] 。 本文用共振光散射技术研究了姜黄素O P蛋白质体系的共振光散射光谱特性 。研究表明 ,蛋白质与 ( ) 非离子表面活性剂 O P 能协同增强体系的共振光散射 RL S 强度 ,RL S 的增强程度与蛋白质的浓度在一 定范围内呈良好的线性关系 ,据此建立了测定痕量蛋白质的一种新方法 。 1 　实验部分 1 . 1 　仪器与试剂 ( ) ( ) F2500 型荧光分光光度计 日本 , 日立 ;U V240 1PC 型紫外可见分光光度计 日本 , 岛津 ;p H S2 F ( ) 型数字