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84 K杨再生和遗传转化体系的优化.pdf

第35卷第7期 西北农林科技大学学报(自然科学版) V01.35No.7 JournalofNorthwestA&F 2007年7月 University(Nat.Sci.Ed.) Jul.2007 84K杨再生和遗传转化体系的优化 李科友,樊军锋,赵 忠,周永学,高建社 (西北农林科技大学林学院,陕西杨凌712i00) [摘要]为了优化84K杨的再生和遗传转化体系,以84K杨树叶片为外植体,采用正交试验研究了不同培养 基和激素配比对芽和芽苗生根的影响,并从预培养时间、浸染菌液浓度、浸染时间、共培养时间及添加AS(乙酰丁香 酮)5个方面,以卡那霉素抗性苗频率为衡量指标,研究了各因素对84K杨遗传转化率的影响。结果表明,84K杨叶 BA0.5 0.05 片最适的芽诱导培养基及激素配比为MS+6 mg/L+NAAmg/L,芽苗最适诱导生根培养基及激素配 MS+NAA0.05 0.05 比为1/2 mg/L+IBAmg/L;优化筛选的最适转化体系为:农杆菌活化菌液用MS液体培养基 稀释10倍,浸染5rain,共培养4d。采用上述优化的再生和遗传转化体系,84K杨每片叶平均生芽数可达20个,芽 苗生根率可达99%,生根数为6条,叶盘转化率可达35%。 [关键词]84K杨;再生系统;遗传转化;转化率 [中图分类号]$792.119.04[文献标识码]A [文章编号] Prioritizationofthe of and systemregenerationgenetic transformationof 84K Populus LI Ke—you,FAN Zhong,ZHoU Jian—she Jun—feng,ZHAo Yong—Xue,GAO AF (CollegeofForestry,NorthwestUniversity,Yangling,Shaanxi712100,China) the of and transformationof 84 Abstract:Toprioritizesystem genetic K,influ— regeneration Populus encesofdifferentmediumand ofhormoneonbudandrootof werestudiedor— proportion leaf-explant by offive time,theconcentrationof thogonaldesigning.Theimpact aspects(pre—culture timeandadditionof transformationof 84Kwasstud— time,CO—culture AS)on genetic frequencyPopulus therateof resistanceasthemeasureindex.Theresultsd

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