若干樟科植物生斑痣盘菌目分类学与该目双基因系统发充学初步研究分析.pdfVIP

摘 要 本研究主要分为三部分内容。第一部分主要是采用传统分类学方法，对樟科植 物上的斑痣盘菌进行了分类学系统研究。通过对安徽农业大学森林菌物保藏室 （AAUF）保存的真菌材料进行初步检查与整理，并选取相关标本进行深入研究， 共鉴定出樟科植物生斑痣盘菌目 3 属 4 种，其中 2 个为新种，分别是奇异皮下盘 菌Hypoderma mirabile  和新木姜子齿裂菌 Coccomyces neolitseae。通过显微镜外部 观察及冰冻切片内部显微检查，对这二个新种的外部形态学特征，内部结构特征 等进行了研究，并作了详细的中英文描述，且附有子囊果外表及生境、子囊、子 囊孢子及侧丝结构等的点线合成图。同时对这些种的地理分布、生态生境等进行了 调查研究；第二部分主要是对采自国内的斑痣盘菌目部分成员进行了分离培养，菌 种转接保藏，单点性状培养，玻璃纸菌丝培养等实验，研究分析了其生物学性状。 结果显示三种不同培养基上同一菌株的生长情况不尽相同，同一物种不同菌株的培 养性状有的相似，有的则不同。一般来说，在营养匮乏的培养基上，容易产生分生 孢子器及线纹黑壳等，而营养丰富的培养基上，则气生菌丝等较为发达；有的菌株 还会分泌红色、黄色水溶性色素等。根据结果可以推测环境条件、寄主等都会对物 种生长产生影响，特别是物种所处的环境的营养条件。第三部分主要是对来源于全 国各地斑痣盘菌目成员进行了系统发育学初步研究，运用分子生物学及生物信息学 相结合的方法，利用 DNA条形码技术，基于 rDNA­ITS和 28S rDNA单独序列，二 基因联合序列构建系统发育树来探讨该目属间、 种间及种内的亲缘关系。 采用 CTAB  法提取供试菌株的 DNA，通过 PCR扩增及测序，将所得的序列在 GenBank 上进行 比对（blast） ，选取合适的序列，以柔膜菌目的 Leotia  lubrica 为外群，分别构建了 系统发育树，结合形态学分类方法，确定物种分类地位。结果显示，在斑痣盘菌目 中，同一属、种的菌株通常会优先聚在一起，但一些表型性状相似，却分隶于两个 不同属、种的也有可能聚在一起。本次研究表明，菌物的鉴定不能仅仅依靠单一方 法，而需要将多种生物技术结合在一起，即以形态学分类为基础，综合其个体发育、 培养性状、多基因综合分析才能准确地进行菌物分类，确定其系统发育关系。分子 生物学作为菌物分类研究的辅助手段，因其快速，准确等特点，越来越凸显其重要 性，另外，为了使研究结果尽量准确，需尽快完善真菌 DNA 条形码技术，加快真 菌 DNA 条形码数据库的建立与优化。虽然分子生物学的方法在真菌分类上有着举 足轻重的作用，但是由于真菌的遗传变异多样性等特点，传统的形态学分类还应该 是真菌分类的最主要依据与方法。 关键词：真菌分类，形态学，培养生物学，生态学，双基因序列分析 I  Abstract  This research  includes  three parts.  The taxonomy of Rhytismatales  on  lauraceae  plants was mainly studied using the traditional taxonomic method in the first part. After  the  sorting  and  inspection  of  the  samples  from  the  Forest  Fungi  Dried  Reference  Collection  of  Anhui  Agricultural  University  (AAUF),  4  species  from  3  genera  of  Rhytismatales parasiticing on lauraceae plants were identified, of which two new species  Hypoderma  mirabile  and  Coccomyces  neolitseae  were  preliminarily  established  by  external examination and internal microexamination of fro