唾液和血清SODMDA含量检测及其在牙周病中的作用.docVIP

唾液和血清SOD、MDA含量检测及其在牙周病中的作用 探讨唾液或血清SOD活性、MDA含量在牙周病中发展过程中的变化情况。方法 选择50例慢性牙周炎患者（CP组）、50例菌斑性牙龈炎患者（PIG）和50例健康者（对照组）。用硫代巴比妥酸（TBA）比色法、羟胺法分别测定MDA含量、SOD活性。结果 同对照组比较，PIG组唾液MDA含量并无明显改变，CP组唾液MDA含量明显升高;CP组和PIG组。唾液MDA含量差异具有统计学意义(P＜0.05)。牙周病各患病组血清SOD活性明显下降（P＜0.05），MDA含量明显升高（P＜0.05)。PIG组中，牙龈探诊出血的患者血清SOD活性明显低于牙龈探诊不出血者（P＜0.05）。不管牙龈探诊出血与否，CP组患者血清SOD活性均无明显改变（P＞0.05）。结论 自由基增加对牙周疾病的发展起着一定的作用。 牙周病是一种主要由牙周菌斑引起的疾病。引起牙周病的主要机理是牙周菌斑内有关致病菌产生的可溶性物质能直接毒害组织细胞，或破坏细胞间质以及激活宿主的炎性反应和免疫反应。炎性反应过程中会产生大量的超氧化物而引起组织的氧化损伤。本研究拟通过测定牙周病患者血清SOD活性，唾液和血清MDA含量，了解牙周疾病发展过程中机体抗氧化能力的变化情况，为牙周病的治疗提供新的思路。 1.材料与方法 1.1研究对象的选择及分组 1.1.1纳入标准 按临床和X线片诊断标准诊断为慢性牙周炎（chronic periodntitis,CP）、菌斑性牙龈炎（plaque-induced gingivitis,PIG）。[1] 无糖尿病、心血管疾病、肾脏及肝脏疾病；无口腔粘膜病变及唾液腺病变，近3月内未作牙周治疗未服用抗生素、免疫抑制剂、还原剂（如VC、VE）等。 1.1.2排除条件 不能满足纳入标准之一的，或诊断为侵袭性牙周炎的患者。 1.1.3选择与分组 2008-2010年来本院牙周病诊室首次就诊的患者，按纳入标准和排除标准，随机选择100例牙周病患者作为实验组，其中男49例，女51例，年龄均在38～50岁。所选病例按临床标准及X线诊断分为菌斑性牙龈炎组（PIG）(50例，男26，女24.)和慢性牙周炎组（CP）（50例，男25，女25.），并按实验组纳入和排除标准选择年龄与研究对外相匹配的健康志愿者作为健康对照组（50例，男24，女26.）。 1.2.标本采集 1.2.1血液的收集及处理 全部受试者均于上午8:30-10:00抽取空腹血2ml，静置30min。血清直接4℃冷藏保存，用于测定SOD活性、MDA含量。保存时间不超过7d。 1.2.2唾液的收集及处理 全部受试者均于抽血前清水漱口，静坐1-5min后将唾液吐入干燥消毒处理过的度管内，约2ml。要求唾液不能混有血液。所取唾液立即离心（15min）取上清液4℃冷藏保存，保存时间不超过7d。 1.3.实验仪器及设备 721可见光分光光度计（厦门分析仪器厂），恒温水浴箱（上海医疗器械七厂，WS2-261-79）， 离心沉淀机（上海医用分析仪器厂，LXJ-II），原子吸收分光光度计（日本岛津AA-6700），SOD、 MDA含量测试试剂（购于南京建成生物工程研究所）。 1.4.测试原理 1.4.1 SOD活性测定原理 通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子O2.-，后者氧化羟胺形成亚硝酸盐，在显色剂的作用下呈现紫红色，用可见光分光光度计测其吸收度。当被测样口中含有SOD时，则对O2.-有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少。通过这一系列的反应过程可以测定出SOD活性。 1.4.2. MDA测定原理 过氧化脂质降解产物中的丙二醛（MDA）可与硫代巴比妥酸（TBA）缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。 1.5.统计学处理 全部数据输入计算机后，用SPSS13.0统计软件包进行处理。采用方差分析进行统计学分析，均数以X±SD表示。P〈0.05表示有统计学意义。 2.结果 2.1各患病组唾液MDA含量比较 CP组患者唾液MDA含量升高，其差异具有统计学意义（P〈0.05）。而PIG组患者唾液MDA含量无显著性改变（表1）。鉴于羟胺法无法测定唾液中SOD酶活性，故未测定。 3.讨论 牙周病是一种主要由牙周菌斑引起的疾病。引起牙周病的主要机理是牙周菌斑内有关致病菌产生的可溶性物质能直接毒害组织细胞，或破坏细胞间质以及激活宿主的炎性反应和免疫反应。炎性反应过程中会产生大量的超氧化物而引起组织的氧化损伤。菌斑性牙龈炎（相当于原分类中的慢性单纯性牙龈炎）和慢性牙周炎（相当于原分类中的慢性成人牙周炎）是牙周疾病中两个主要类型。两种类型牙周病的发生、发展均与局部的菌斑密切相关。但是牙龈炎病变仅限于牙龈组织，而慢性牙周炎则具有病变牙支持组织破坏的特点，特别是牙周韧带