抗菌肽D基因导入番茄及转基因植株的鉴定.pdf

遗传000208 遗传 HEREDITAS 2000　Vol.22　No.2　P.86-89 抗菌肽D基因导入番茄及转基因植株的鉴定 田长恩　王正询　陈韬　周玉萍　黄自然　黄亚东 摘　要：用花粉管通道法将柞蚕抗菌肽D基因导入番茄，获得了转基因植株。应用PCR 技术、DNA斑点杂交以及Southern印迹分析表明，抗菌肽D基因已整合到番茄基因组； 而且，位于目的基因下游的胭脂碱合成酶基因有表达。青枯假单孢菌活体接种结合高 发病大田种植试验结果显示，部分转基因植株的子一代具有较强的抗青枯病能力。 关键词： 抗菌肽D基因； 花粉通道法； 番茄； 青枯病 中图分类号： Q78； S330　　　　文献标识码： A　　　　文章编号： 0253－9772 (2000)02－0086－04 Transfer of Antibacterial Peptide D Gene into Tomato and Identification of Transgenic Plants TIAN Chang-en　WANG Zheng-xun　CHEN Tao　ZHOU Yu-ping （Department of Biology, Guangzhou Teachers College, Guangzhou 510405 ） HANG Zi-ran　HANG Ya-dong （Department of Sericulture, South China Agricultural University, Guangzhou 510642 ， China ） Abstract: Key words: antibacterial peptide-D gene; pollen-tube pathway; tomato; bacterialwilt 　　70年代中期，人们发现天蚕在各种理化或生物因子刺激下，在其血淋巴中可诱导 广泛，对诸如绿脓杆菌、大肠杆菌和金色葡萄球菌等人畜病原菌 〔1〕 ，以及烟草 〔2〕 〔3〕 〔4〕 、马铃薯 青枯病和水稻白叶枯病 等植物病原菌均有杀、抑作用。抗菌肽D 〔5〕 由36个氨基酸组成，其结构已有较为详尽的研究 。徐飞等根据抗菌肽的氨基酸组成 〔6〕 ，共122bp。因此，将抗 结构人工合成了抗菌肽D(AP-D:antibacterial peptide-D)基因 菌肽基因导入植物，探索增强作物抗细菌病能力已完全可行。 　　番茄是一种世界性蔬菜，具有很高的经济价值。但其病害多，其中尤以青枯病等 万方数据 file:///E|/qk/yc/yc2000/0002/000208.htm（第 1／8 页）2010-3-23 12:22:08 遗传000208 〔7,8〕 〔2〕 〔3〕 细菌病的危害广而重 。业已发现，将抗菌肽基因导入烟草 、马铃薯 和广 〔9〕 藿香 皆可增强这些作物对青枯病的抗性。因此，若将抗菌肽基因导入番茄，可为 番茄抗青枯病育种提供新的种质资源。花粉管通道法是一种简单实用的外源基因导入 〔10,11〕 〔12〕 〔13〕 法，已在棉花