模拟水解酶的合成及其催化动力学.pdfVIP

2006年6月 重庆大学学报(自然科学版) Jun．2006 箜!!查箜!塑 垫竺苎丝曼!竺2墼12§型：i翌2里!垡竺型量：!：21：兰!兰222 1坐：望登2：! 文章编号：1000一582X(2006)06—0102—05 模拟水解酶的合成及其催化动力学。 谢家庆1，魏星跃2，张春晓3，李军1，王敏1 (1．重庆工学院生物工程学院，重庆删0；2．重庆工商大学环境与生物工程学院，重庆400060； 3．重庆交通大学土木学院，重庆400067) 摘要：介绍了2种具有吗啉环的Sch诳碱过渡金属配合物的合成和表征，并且配体相同而金属离 子不同的2种配合物作为模拟羧酸酯水解酶被用于催化对硝基吡啶甲酸酯(PNPP)水解．研究了催化反 应的动力学机理，建立了PNPP催化水解的动力学模型，并计算了相关的动力学和热力学常数．研究结 果表明：2种配合物在催化PNPP水解中表现出较好的催化活性；在缓冲溶液中随着溶液pH的增大， PNPP催化水解速率提高；配合物中金属离子极化作用影响PNPP催化水解速率． 关键词：Sch滩碱配合物；合成；PNPP水解；催化；动力学 中囤分类号：O“3．12 文献标识码：A 生物体不断进行的新陈代谢是生物体存在的基 环支链的Schiff碱配合物，从动力学的角度研究了它 础，而新陈代谢是由为数众多的各式各样的化学反应 们催化PNPP水解的反应． 所组成．这些反应的一个基本特点是它们在温和的条 1实验部分 件下(常温、常压，接近中性pH值)进行．生物化学反 应在生物体内如此顺利和迅速地进行，究其原因就是 1．1试剂 由于生物体内含有一类特殊的催化剂——“酶”作为 乙醚、甲醇、乙醇为无水试剂，乙酸乙酯，Co 生化反应的催化剂．天然酶的反应条件温和、催化效率 高和高度的专一性，因而天然酶的催化作用机理和催 为分析纯试剂．％s(三羟基甲基氨基甲烷)，PNPP(对 化条件的探索一直是天然酶催化研究中的重要内容之 硝基苯酚吡啶甲酸酯)，均从Si鲫a公司购买．水为高 一．但是由于天然酶结构的复杂性，以及天然酶的不稳 纯去离子水．化合物l和化合物2由四川大学有机实 定性和价格昂贵等因素，使这方面的研究受到一定的 验室提供． 限制．因此，酶的化学模拟已成为配位化学和生物无 1．2合成 机化学研究的热点领域¨J． 在仿酶研究中，一个重要的方面是的生物水解过 mL无水甲醇中，N：保护下与lOmmol化合物2混合， 程模拟催化研究，如模拟水解酶催化羧酸酯水解[2“】， 回流3—5h，TCL跟踪反应，若有沉淀析出，过滤后无 氨基酸水解怕’和磷酸酯水解¨’8J．在天然水解酶中， 水乙醇重结晶．若无沉淀析出，减压浓缩反应液，柱层 锌离子被认为是结合底物和亲核基的催化活性中心。 析分离，乙酸乙酯淋洗，得黄色固体．收率82％．m．p． 它可以活化底物的羰基或活化水分子【9】．而在模拟酶 178～180℃．1H 研究中发现，含其它金属离子活性中心的某些有机配 合物具有相似于水解酶的催化活性．为探索生物体中 水解酶催化的作用机理，曾经对具有对称中心的含2 个水的草酰胺桥联双核铜配合物催化PNPP水解的反