比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的新进展.pdfVIP

第 卷第 期 大 连 医 科 大 学 学 报 28 3 Vol .28 No.3 年 月 2006 6 Journal of dalian medical university June 2006 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的新进展 1 2 2 何巧洁 ，唐英华 ，杨兴无 （ 大连医科大学 第二临床学院 呼吸内科，辽宁大连 ； 大连医科大学 第二临床学院普外科，辽宁大连 ） 1. 116027 2. 116027 摘要：比较基因组杂交（ ）是一种将消减杂交和荧光原位杂交相结合的分子细 com arative enomich bridization CGH p g y 胞遗传学技术，可在全部染色体区带上检测基因组间DNA拷贝数的变化并定位。本文对CGH技术及其在肿瘤研 究中的进展作一综述。 关键词：比较基因组杂交；肿瘤；分子细胞遗传学 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） R730 A 1671-7295 2006 03-0242-04 肿瘤的发生是一个多阶段、多遗传变异累积的过程。了 又称为DNA拷贝数核型技术。与传统的原位杂交相反，该 解肿瘤的遗传变异对于阐明肿瘤的发病机理和发展过程具 法不是将单一的、已定的DNA探针杂交在受体的分裂中期 有重要意义。目前用于这一研究的技术包括肿瘤细胞核型 或间期细胞上，而是以待检肿瘤组织的基因组DNA为杂交 分析（ ）、原位杂交（ ）以及微小卫星 分析等。但 检测样本，正常组织的 为参照样本，分别用两种不同荧 C ISH DNA DNA 这些技术不能对肿瘤的整个基因组进行完整分析，因此不能 光染料标记，然后将标记的DNA等量混合，与正常淋巴细胞 全面评价其遗传学改变。近年发展起来的DNA探针微阵列 中期染色体进行杂交（即反向原位杂交），再通过检测两种颜 （ 芯片）技术能同时准确而快速地获得成千上万个基因 色的荧光强度，根据颜色的比例来显示基因组的结构状况。 DNA 表达信息，但 芯片技术的应用受到以下限制：（）目前 如果探针中某一染色体或染色体亚区呈现过度表达或低表 DNA 1 cDNA克隆有限。在人类细胞中已知表达的10 000!50 000 达，则在正常染色体的相应区域内便呈现较强或较低的信 个基因中，只有 个 克隆可以得到。因此，极度 号，表明该区域存在 序列的扩增或丢失。 15 000 cDNA DNA 缺乏可得的、序列经过证实的cDNA克隆就大大限制了该技 CGH的技术方法 术的发展和进步；（）制作微阵列标本的准确取样方法及在 2 载体上的牢固结合技术