南极海洋芳香烃低温降解微生物的拉曼光谱分析.pdfVIP

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南极海洋芳香烃低温降解微生物的拉曼光谱分析.pdf

第3i卷,第2期 光谱学与光谱分析 v01.31,No.2,pp418。421 l February,2011 2。0 1年2月 and Spectr。osco。pySpectra—lAmlysis 南极海洋芳香烃低温降解微生物的拉曼光谱分析 洲1’2 王以斌1’2,缪锦来1’“,何碧娟3,梁强1’2,刘芳明1’2,郑 1.国家海洋局第一海洋研究所,山东青岛266061 2.国家海洋局海洋生物活性物质莺点实验室,山东青岛266061 3.广西科学院,广西南宁530007 摘要激光镊子拉曼光谱技术可以实现在自然状态下对单个细胞或细胞器较长时间的观察研究。应用激 光镊子拉曼光谱技术实时观察南极微生物低温降解芳香烃过程中单个南极细菌的细胞生长和胞内生物大分 子的动态变化过程,收集、分析其拉曼光谱,结果发现:单细胞的拉曼光谱反映了其细胞内部的生命物质组 成。南极动球菌NJ41和希瓦氏菌NJ49生长和降解芳香烃过程中产生蛋白类和葡聚糖类物质较多,而假交 替单胞菌NJ289生长和降解芳香烃过程中产生脂类物质较多,其次才是蛋白类物质;各菌株产生蛋白类物 质的多少是与产生的降解限速酶对应的,也是与低温降解芳香烃的能力是直接相关的。 关键词 激光镊子拉曼光谱技术;南极微牛物;低温降解;芳香烃 中图分类号:Q935文献标识码:A DOI:10.3964/j.issn.1000-0593(2011}02-0418—04 索【“12]。本研究在国内首次将LTRS技术应用于南极微生物 引 言 低温降解芳香烃过程的分析,通过实时观察监测单个南极细 菌细胞低温降解芳香烃的动态过程,结合光镊进行细胞分选 tweezersRamail 单细胞激光镊子拉曼光谱技术(1aser 并记录芳香烃低温降解过程中胞内、胞外的芳香烃浓度变化 spectroscopy,LTRS)是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技以及细胞生化代谢过程中各种细胞产物的变化,获得、分析 术相结合用于单细胞探测的新技术。它用同一束光来囚禁细 低温菌降解芳香烃过程和细胞生长变化的拉曼光谱,探讨其 胞和激发细胞的拉曼光谱,细胞处于溶液中,其生理活性不 与芳香烃降解代谢过程的相互关系,试图从单个细胞水平以 受影响,可以在接近其自然的生理状态下实现较长时间对单 及细胞群体水平获得对南极微生物低温降解芳香烃的新认 个细胞或细胞器的监测和研究[1-3]。通过实时观察单个细胞识。 或细胞器的生物化学过程,分析拉曼光谱特征峰的位置、强 度等可以获知掩盖在群体平均信息下的个体生命信息和实时 1实验部分 生命物质变化的信息,从而有效地了解细胞的真实生理过 程。牛物体内蛋白质、脂肪、核酸和糖类等的组成成分、二 1.1材料 级结构和交互作用等有用信息都可以从光谱中拉曼特征峰的 菌株:三株可低温(0~10℃)降解芳香烃的南极嗜冷细 位置、强度和线宽中获得[2“’5],近年来光镊拉曼光谱在探菌:动球菌(Planococcus 索细胞的结构、功能及细胞生长、凋亡等方面取得了迅速发 sp.)NJ49,假交替单胞菌(Pseudoalteromonassp.)NJ289,其 展,已成为探究生物体内如DNA、RNA、蛋白质、脂类、糖中10℃,10d时NJ41对萘的降解率可达48.8%,5℃,i0 类等生命物质结构的有力手段【l{]。 d时可达43.2%;i0℃,10

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