- 1、本文档共7页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
人骨唾液蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达.pdf
ISSN1007.7626 中国生物化学与分子生物学报 2004年6月
CN1 1-3870/Q Molecular 20(3):325~329
ChineseJoumalof and Biolo霉Ⅳ
Biochemistry
人骨唾液蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
王 董 燕+。, 张宏斌, 武 婕, 郑文岭
(广,111军区广州总医院医学实验中心,广州510010)
摘要 利用RT—PCR技术,从人骨膜组织总RNA中扩增长度为1kb的人骨唾液蛋白(bone
II,进行双链核苷酸序列测定.构建人BSP毕
sialoprotein,BSP)基因编码区序列,克隆至pBluescript
赤酵母表达质粒pPICZaA—hBSP并导入毕赤酵母Pichiapastoris
测rhBSP的分泌表达.采用镍离子亲合层析纯化rhBSP并检测生物学活性.结果表明,克隆片段与
基因库所登录的序列相一致,分泌表达的rhBSP.His融合蛋白分子量约为67kD,占培养上清总蛋白
的80%,浓度约为0.248
g/L,rhBSP蛋白具有抑制羟基磷灰石晶体生长的活性.
关键词 骨,唾液糖蛋白,分泌表达,毕赤酵母
中图分类号Q812
and ofHumanBone
CloningExpression
inPichia GSl15
Sialoproteinpastoris
WANG
Jie。,DONGYan一,ZHANG Jie,ZHENG
Hong.bin,WU Wen.1ing
(CenterofMedicalResearch,General 510010,China)
HospitalofGuangzhouMilitaryCommand,Guangzhou
kb
Abstract0Be DNA forhumanbone was with
fragmentencoding sialoprotein(BSP)cDNAamplified
human totalRNAas andclonedto II.ne
nucleotide was
periosteum template pBlueseript sequenceanalysis
vector wasconstructed.1inearizedandintrodueedtoPichia
performed.r111eexpressionpPICZaA—h粥Pgene
GSl15 of was
rhBSPdetectedSDS.PAGEandWestem
pastoris byelectroporation.Theexpression by blotting.
was
TherhBSP Ni“一
文档评论(0)