模拟移动床分离纯化纳豆激酶的研究.pdfVIP

第11期（总第262期） 农产品加工·学刊 No.11 文章编号：1671-9646（2011）11-0029-04 模拟移动床分离纯化纳豆激酶的研究 1，2 3 1，3 刘妍妍 ，李良玉 ，张丽萍 （1. 黑龙江八一农垦大学生命学院，黑龙江大庆 163319；2. 吉林大学生物与农业工程学院，吉林长春 130022； 3. 黑龙江省农产品加工工程技术研究中心，黑龙江大庆 163319） 摘要：利用模拟移动床从纳豆激酶发酵液中分离纯化纳豆激酶，通过单柱试验计算出模拟移动床的分区方式及初始 参数，利用正交试验方法优化参数，最终所得纳豆激酶的纯度为90%，收率为85%，活性为（8000±50）IU/mg。 关键词：模拟移动床；纳豆激酶；分离纯化 中图分类号：TQ925 文献标志码：A doi：10.3969 NattokinaseSeparationandPurificationbySimulatedMovingBed Chromatography 1,2 3 1,3 LiuYanyan，LiLiangyu，ZhangLiping Heilongjiang163319，China） Abstract： ±50） IU/mg. Keywords： 纳豆激酶（NK）是在大豆发酵过程中或在纳豆 操作，生产效率难以提高，从而造成纳豆激酶分离 [3] 激酶专门培养基中由纳豆枯草杆菌（BacillusSubtilis纯化的成本很高，难以实现工业化生产 。因此，如 natto）产生的一种丝氨酸蛋白酶，可水解纤维蛋白何找到一种适合于工业化生产的工艺及配套设备也 成小肽和氨基酸，和蚯蚓纤溶酶、蛇毒纤溶酶一样 就成为了一个难题。 [1] 可直接溶解血栓 ，还具有降低血液黏度、降血脂、 模拟移动床色谱分离技术是一种高效、先进的 降胆固醇，改善血液循环状况，维持血细胞的正常 分离纯化技术，属于工业高新技术。 目前，在“精 [2] 形态的功能 。 细分离”领域有广泛的应用市场，在国外已遍及石 研究表明，纳豆激酶是一种溶栓效果十分显著， 油化工、食品、精细化工、生物发酵和医药等领域 并且能够预防和抑制血栓产生与扩增的具有潜在药 应用。因此，本试验利用模拟移动床技术分离纯化 用价值的物质。近年来，国内外纳豆激酶分离纯化 纳豆激酶，制备出高纯度的纳豆激酶，并为其产业 的相关研究很多，主要有：层析法、磁性微球分离 化提供技术支持。 法、集成化分离技术，包括双水相亲和分配技术、 1 材料与方法 扩张床吸附技术、混合模式扩张床吸附技术等。 以 上分离方法虽然工艺简单，实验条件容易控制，在 1.1试验材料 纳豆激酶分离纯化中得到了广泛应用，但至今都停 纳豆激酶发酵液，自制；树脂，陶氏、三菱等 留在实验室研究阶段，而且总产率较低，多为间歇 公司提供。 收稿日期：2010-05-25 基金项目：黑龙江省农垦总局科技计划项目（HNKXIV-06-05a）。 作者简介：刘妍妍（1979- ），女，黑龙江人，在读博士，研究方向：农畜产品加工。E-mail：spxylyy@126.com。 30 农产品加工 ·学刊 2011年第11