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广西师范大学学报(自然科学版)
2003年10月 GUANGXI Vol21 No．2
JOURNAI，OFNORMA!，UNIVERSITY
刚果红／TritonX一100／蛋白质共振光散射
体系的研究及分析应用
吴瑷’，周承荣，孙姝娜，王粤博，杨景和
【山东大学化学与化工学院，胶体与界面化学教育部重点实验室．山东济南250100)
蛋白质作为生命活动的物质基础，其定量分析在生物学、医学及其营养科学等领域中具有重要意义．
共振光散射(RI，s)分析技术应用于蛋白质的测定具有快速、灵敏的特点．应用蛋白质测定的共振光散射探
针主要有卟啉，酸性三苯甲烷染料以及酸性偶氮染料等．本论文对刚果红(双偶氮类阴离子染料)Tx
100一蛋白质的共振光散射光谱进行了研究，并提出了蛋白质灵敏的检测方法．
1仪器和药品
F4500型荧光分光光度计(日本日立)，Delta320一S酸度计(Mettler
上海生物制剂厂)(10～g／mI。)，0．2
mol／I．)，TritonX一100(1．0×10mol／I。)．其他试剂皆
冰箱中保存．刚果红(上海试剂三厂)(1．0×10
为分析纯．实验用水为3次蒸馏水．
X／11111
图1共振光散射图谱
HCI．(5)Na H【、l 100
‘1)刚果红“2)剐粜红Na，C^H一0 3C6H—O BSA(1)刚果}1．1XN83C6H，()，HCI．
‘5)刚果红Na3C6H—OHCI—BSA．(6)刚果红TX100一Na3C6H。1)?一BSA
4 3
Conditions：CR8 0×105tool／L．TX—100：30x10mol／I，．Na3CaHsO：HCI(pH=275)：0lmol／1，．1iSA：50×10g／I．
基金项目：高等学校重点实验室访问学者基金资助
第21卷 广西师范大学学报(自然科学版)
2结果与讨论
2．1共振光散射谱
由图1，表面活性剂(Triton
强，以360nm处共振光散射强度增强最大，本文选定在360nm处进行研究．
2．2最佳实验条件的选择
1．0mI，0．2
Tritonx—i00的浓度在2．0×10_4～3．0×10—4mol／I。范围内，体系的共振光散射增强最大且恒定，实验
4 mol／I。．
中选取TritonX一100的浓度为3．0×10
X100和刚果红，加缓冲溶液，再加人蛋白质，效果最好．当反应时间为
实验中以先加入Triton
20min时，体系的共振光散射强度达到最大，且3h内保持不变．
在最佳实验条件下．对体系可能共存的阳离子、阴离子、氨基酸、DNA等多种物质进行了干扰实验，发
现DI，一丙缬氨酸、I，一组氨酸、fsDNA有较大干扰．
2．3工作曲线及分析应用
BSA的线性范围为5．0×10“～8．0×10g／mI～一0．990 g／
mI。；HSA的线性范围为1×101～4×10g／mI，，r一0．993
标准加人法测定合成样品，回收率在95．1％～102．9％之间．
参考文献
CZ．LiYF，MaoG．et 401
[1]Huang J a1．Analyst，1998，123：1
K SY．AnalChimActa·1997，357：9i5
[2]MaCQ，Li A，Tong
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