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肺炎支原体实验室检测方法的研究进展 谷雅君 王蓉杨薇薇 刘运德 郑芳 天津医科大学医学检验学院 肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)是引起上呼吸道感染、气管支气管炎及非典型肺 炎的常见病原体之一。由于肺炎支原体感染所致的社区获得性肺炎患者临床表现不典型，经 过10-20天的潜伏期，可出现一些非特异性症状如头痛和发热，常伴有无力和干咳，根据临 床症状不易作出鉴别诊断。常被忽视而导致严重的合并症[1,2]。由于肺炎支原体无细胞膜， 作用于细胞膜的抗菌药物对其无杀伤作用[3]，加上其感染初期临床表现不明显，因此，及时、 有效的进行肺炎支原体感染的实验室诊断变得尤为重要。肺炎支原体检测手段常见的有培养 法、血清学检测、分子生物学检测方法等等[4,5]，本研究现对肺炎支原体感染的实验室检测 方法综述如下。 非特异性抗体检测主要采用冷凝集试验。冷凝集素是肺炎支原体的非特异性抗体，它只 有抗I型由肺炎支原体感染产生，它是由肺炎支原体多克隆激活B淋巴细胞，产生非特异的 与支原体无直接关联的抗原的抗体，即冷凝集素。冷凝集试验是诊断肺炎支原体感染的传统 方法，但其灵敏度和特异度均不理想，并且该试验灵敏度及特异性较低，不能作为确诊指标， 仅为参考诊断指标。 3．2特异性抗体检测 3．2．1补体结合试验(CFT) 补体结合抗体在肺炎支原体感染后7～9天开始上升，3～4周达高峰，约90％的肺 炎支原体感染者检测结果呈阳性。单倍血清效价1：64～1：128者或双份血清四倍以上 o肺炎支原体 时有诊断意义，eFT法检测抗Mp-IgM的灵敏度与特异度分别为65％和97％[91 与生殖道支原体及嗜肺军团菌有交叉反应，在某些神经系统疾病和急性胰腺炎时可出现假阳 性。但因eFT需要一定的仪器和技术，操作较复杂，不适用于临床常规检测。 3．2．2ELISA法 ELISA法可检测特异性IgM和IgG抗体，检测方法简单，为诊断肺炎支原体感染的实用、 可靠方法。ELISA捕捉法以P1McAb检测标本中肺炎支原体分子量43ku多肽或190ku的P1 蛋白，3小时即可完成试验，特异度高，灵敏度为104cfu／uL标本。ELISA法操作简便、 快速，适于临床实验室作为Mp感染的常规检查。 Mp—IgM(theSerion)进行比较，结果显示该检测法的灵敏度和特异度分别为78．57％和 89．47％，P蛋白与P1、P116蛋白同样可作为肺炎支原体感染的免疫学诊断相关指标。 3．2．3明胶颗粒凝集法 采用肺炎支原体细胞膜成分致敏人工着色的明胶粒子，被致敏的着色明胶粒子再与被检 者血清中存在的肺炎支原体抗体发生肉眼可见凝集现象的原理。即直接反向凝集试验。该法 对间接凝集试验作了改进，是用明胶颗粒取代动物红细胞作为载体，从而消除许多非特异性 反应。该方法基于特异性免疫凝集原理，当待测标本存在肺炎支原体抗体时，抗原抗体发生 反应使颗粒凝集，发生清晰的肉眼可见凝集反应，不需任何设备、操作简便、特异性及灵敏 度高，用于早期诊断，适合实验室常规检查。该法用明胶颗粒作载体，从而消除了许多非特 异性反应，检测血清Mp—IgM的特异度高，无需特殊仪器即可操作，方便快捷，不仅对肺炎 支原体感染具有诊断价值，且测得的抗体效价高低与肺炎支原体感染严重程度呈正相关。 3．2．4 MG链球菌凝集试验 158 肺炎支原体感染后，约1／3患者的血清中可出现能凝集甲型链球菌MG株抗体，效价在 1：20以上。而病毒性肺炎无此抗体出现，故本试验有助于鉴别两者。 3．2．5金标免疫斑点法(DIM) 金标免疫斑点法根据抗原抗体免疫复合反应。将肺炎支原体抗原固定在反应板上，其特 异地与血清中抗肺炎支原体抗体结合形成复合物。胶体金标记的抗人IgG抗体或I鲥抗体再 与复合物形成肉眼可见的红色圆斑，借此可判断结果的阳性或阴性。该法操作简单快速、经 济，但肺炎支原体感染时间短或窗口期患者的标本，由于抗体还不存在或滴度太低，检测结 果可出现阴性，有漏诊可能，不宜用于临床诊断。何惠梅等n11应用此法检测471例门诊和住 院肺炎、上呼吸道感染患儿的抗体，肺炎支原体抗体检测总阳性率为40．9％。 以上方法虽对诊断肺炎支原体感染有一定帮助，但由于有