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重组瘦素基冈对骨髓基质细胞增殖分化的影响 中文摘要
重组瘦素基因对骨髓基质细胞增殖分化的影响
中文摘要
目的：
stromal
基质细胞(marrow
方法：
转基因细胞株，普通光镜及荧光显微镜下观察转基因细胞形态，采用分子生物学法
(RT-PCR法)和免疫学法(Westernblot法)分别从mRNA水平和蛋白质水平检测
殖情况，ELISA法检测转基因细胞上清骨钙素(OC)分泌水平，并采用对硝基苯磷
测转基因细胞中成骨细胞分化相关基因Cbfal和Cbq3的表达。
参士甲
耋口习弋：
PCR、双酶切及序列测定结果显示成功构
成功获得约450bp的人Leptin基因，
并转染密度梯度分离法获得的大鼠骨髓基
建了重组基因真核质粒pTracerTM—Leptin，
质细胞，加压筛选后获得转基因细胞，荧光显微镜下可观察到绿色荧光，并伴有细胞
形态变化，实验组的RT-PCR和Westernblot结果均出现目的条带，表明脂质体介导
的Leptin基因可以在骨髓基质细胞中表达，且促进MSCs增殖，并有一定的时间依赖
性，转基因细胞上清中OC含量增加，ALP活力上调，成骨细胞特异性转录因子Cbfal
重组瘦素基因对骨髓基质细胞增殖分化的影响 中文摘要
和Cb币mRNA表达量也增高。
结论：
基因可以使其增殖，且促进成骨样改变。
关键词：
瘦素；基因重组；骨髓基质细胞；增殖分化
作 者：韩国胜
指导教师：陈亮
Il
onProliferationandDifferentiationofBone
TheEffectofRecombinantGene
Leptin Marrow兰塑翌璺!竺业垒垒堕啦
RecombinantGeneon
TheEffectof Leptin
DifferentiationofBoneMarrowStromalCells
and
Abstract
Objective：
Toconstructrecombinant and theeffecton and
Leptingene study proliferation
differentiationofbonemarrowstromal
cells(MSCs)．
Methods：
wascloned RT·PCR fromhuman tissueand
Leptingene byusing technique adipose
vectorwhichWaslabeledwitIlGFP．TheMSCsof
insertedintothe 1M．CMV／Bsd
pTracer
I
collected andculturedin
SDratwere bydensitygradi
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