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叶黄素的体外抗氧化功能 廖萍泰1 惠伯棣2 裴凌鹏2 孙志国2 张 帅2 1(兰州大学公共卫生学院，兰州，730000) 2(北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室，北京，100083) 摘 要 类3个组分。然后，应用微弱发光检测技术测定和比较各组分在体外淬灭单线态氧的能力。结果表明，反式和 顺式叶黄素及其酯类均有体外淬灭单线态氧的能力，同时，还可观察到顺式异构体的“延迟发光”现象，说明反式 异构体与顺势异构体可能有不同的淬灭单线态氧的机理。 关键词 叶黄素酯，叶黄素异构，淬灭单线态氧 Wihelm 叶黄素(1utein)1831年首次由Heinrich检测技术成为研究体外淬灭单线态氧的基础技术之 和Ferdinandwackenroder从胡萝卜根中提取出来。一。 它是一种含羟基的类胡萝卜素，习惯名称为叶黄素或 本项研究应用反相C，。高压液相色谱分离和纯 黄体素，半系统命名为3，3’一二羟基一p，a一胡萝卜素， 化叶黄素酯、反式、顺式叶黄素单体3个组分，随后用 分子式为C40H5602，分子质量为568．88，其分子结构化学发光检测技术比较了它们在体外淬灭单线态氧 见图1。已经证明，叶黄素对人眼视网膜以及黄斑有 的能力。这一研究的结果对以万寿菊花为原料发展 保护作用、可降低白内障的发病危险、防止紫外线对 富含叶黄素的功能性食品和药品具有明显的意义。 皮肤的损伤、调节人体免疫功能等。 1 材料与方法 帅汝kk似洲1．1材料与试剂 万寿菊干花颗粒购自山东诸城外贸集团。萃取 图1全反式叶黄素分子的结构 和化学发光实验所用试剂均为分析纯试剂，由北京化 目前尚无叶黄素人工合成产品在市场上出现。 所有叶黄素均来自与天然资源——万寿菊的花中获 乙酯和乙腈均为色谱纯试剂(Fisher)。 得。万寿菊(Tn酽￡巧Pr∞缸L．)属菊科(CDmp∞娩)1．2仪器 万寿菊属(n￡曙嚣L．)的植物。万寿菊花含有丰富 的类胡萝卜素化合物，主要为叶黄素、玉米黄素、p一胡 萝卜素和大量的叶黄素酯。实际上，叶黄素在万寿菊 花中主要以酯的形式存在。 院生物物理研究所设计并制造；用于组分含量测定的 单线态氧是一种活性氧自由基。自由基是能独 紫外一可见光分光光度计为SHIMADZU 立存在的含有一个或一个以上不配对电子的原子或 1501型。 原子团。由于未成对电子具有成对的趋势，故自由基 1．3方法 显示出较活泼的化学性质…。早在1930年，Mul— 1．3．1叶黄素酯和单体顺、反式异构体的制备 liken等就通过分子轨道的计算预言了单线态氧的存 取一定量的万寿菊干花颗粒于研钵中，加入2～ 在。至1963年，Khan和KaSa确立了用NaClo和 H202产生单线态氧的反应。从此，对单线态氧的研液。上清液中含有大量的叶黄素酯。使用真空旋转 究得以迅速发展旧J。微弱发光检测技术的发展使得 干燥仪，在45℃、一O．08MPa、60～90r／min条件下 在体外直接检测单线态氧变得更为简单。单线态氧 浓缩萃取液至原体积的1／4。将浓缩物置于三角瓶 淬灭剂可使光子计数降低而被检出。因此，微弱发光 第一作者：硕士研究生(惠伯棣博士为通讯作者)。 液，搅拌过夜(12h)，进行酯的皂化(见图2)bJ。 收稿日期：2005—12一14，改回日期：2005—03一04 皂化完全后，用乙醚和质量分数2％的NaCl水溶液 伯l2四曼y殳!：!!丝鱼：垒!!Q塑12盟2 万方数据