胶原蛋白的制备，分离纯化和鉴定表征.pdfVIP

维普资讯 I McT 胶原蛋白的制备，分离纯化和鉴定表征冰 Preparation，Separation，PurificationandDeterminationofCollagen 戴 红 张宗才 张新申 DaiHongZhangZongcaiZhangXinshen (四川大学皮革化学-b工程教育部重点实验室，成都，610065) TheKeyLaboratoryofLeatherChemistryandEngineeringofMinistryofEducation，SichuanUniversity，Chengdu，610065，China 摘 要 本文介绍了胶蛋白的制备方法 然后讨论了色谱技术在胶原及其水解产物的分离纯化方面的 应用．最后介绍了胶原蛋白的鉴定表征方法 关键词：胶原 制备 分离 纯化 Abstract：Thispaperintroducesthepreparationofcollagen，andreviewsthechromatographytech- niquesandtheirapplicationinseparationandpurificationanddeterminationofcollagen Keywords：collagen~；preparation；separation；purification 胶原蛋白是动物所有结缔组织 皮、腱、韧带 软骨等 原水解液，并且只有通过对这些蛋白质分子进行分离 纯化和 的主要蛋白成分，是最为丰富的蛋白质之 占哺乳动物所有 制备，才能获得 定质和量的纯品 才能满足结构、物性测 蛋白质的25％～3O％卜，是自然界主要可再生资源之 据估 定和应用的要求 因此对胶原水解产物进行分离 有着非常重 计．自然界从低等的无脊椎动物到高等的哺乳动物 总共大约 要的意义。 有500亿吨以上的胶原 自古以来，由于生皮胶原分子天然 本文首先介绍了胶原蛋白的制备方法．然后综述了色谱技 的独特骨架，且动物皮中80％～85％为胶原 使得动物皮胶原 术在胶原及其水解产物的分离纯化和鉴定表征等方面的应用 被大量地用于制作皮革 I然而随着时代和科学技术的发展， 1 胶原蛋白的制备 人们在探讨胶原的化学、物理、生物学性质的过程中，逐渐 胶原的研究虽然已经有接近9O年的历史 由于胶原不溶于 认识和开辟着胶原广泛应用的新领域．以求开发具有高附加值 水 要想将它们从组织中分离并纯化非常不易 1947年欧洲霍 的胶原新产品 尤其是当人们认识到胶原具有其它高分子材料 维奇(OPEXOBNU)等人从动物皮中用柠檬酸缓冲液抽取胶原溶液后 无可比拟的弱的抗原性 生物相容性和生物降解性时，人们更 II 为胶原的研究工作打开了途径 意识到胶原作为生物材料在医药、仪器、化妆品、饲料肥料 1．1胶原的制备步骤 等工业中的重要性 在医药卫生领域被广泛地应用于烧伤、 一 般为研究目的而进行的胶原分离 由下列步骤组成 即 创伤、眼角膜疾病 美容矫形 硬组织修复 创面止血等方 萃取 分离 提纯 面… 在胶原的应用过程中，有的是胶原纤维网、有的是胶原 1．2 胶原的制备方法 水解混合物、有的是提纯的胶原。根据对皮胶原蛋白水解程度 12．1革奴 的不同 其中所含分子量的大小、分布有所不同 但其中主 萃取是胶原制备的第 个步骤．即仔细地把要萃取的皮肤 要组份是多肽、胶原等蛋白质类的复杂生物分子(boPoIYme『剥离下来 除去那些非胶原的成分 并在冷冻条件下将皮肤切 biomacromolecule)。而只有通过对这些蛋白质分子进行分离和分 碎和匀浆 然后洗涤 以洗去可溶性非胶原蛋白质 洗涤后